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目的:
观察脓毒症状态下早期大鼠心肌纤维化的改变及其与心脏功能的关系并探讨丹芪和肝颗粒对心肌纤维化的影响及其机制。
方法:
采用经阴茎静脉注射脂多糖的方法制作脓毒症模型。体重为230~250g的健康雄性Wistar大鼠72只,随机分为模型组(32只)、丹芪和肝颗粒干预组(16只)、空白对照组(24只)。模型组分为早期低剂量组(LPS 3mg/kg/d iv.×3d,第7日处死)、早期高剂量组(LPS 5mg/kg/d iv.× 3d,第7日处死)、晚期低剂量组(LPS 3mg/kg/d iv.×3d,第14日处死)、晚期高剂量组(LPS 5mg/kg/div.×3d,第14日处死)。丹芪和肝颗粒干预组于制模后24小时开始按10ml/kg(相当于10g生药/kg)灌胃给药,每日2次,直至第14日被处死。各组动物处死前均行经右颈总动脉左心室内插管,监测血流动力学及左室功能变化。采动脉血用酶联免疫法(ELISA)测定血清Ⅰ型前胶原羧基端肽和血清转化生长因子β1含量。采血完毕后处死大鼠,取出心脏,分离左心室,冻存。碱水解法测定心肌组织匀浆上清羟脯氨酸含量。心脏组织行Masson染色,光镜和电镜观察,用计算机图像分析系统测定心肌胶原容积分数(CVF)和心肌内血管周围胶原面积(PVCA)。
结果:
1.脓毒症时,早期(7天)左心室收缩峰压(LVPP)、左心室压力上升最大速率(+dp/dt)下降,左心室舒张末期压(LVEDP)及左心室压力下降最大速率(-dp/dt)上升;晚期(14天)左心室功能较对照组无统计学差异(P>0.05);高剂量组较低剂量组变化明显。
2.脓毒症时,血清Ⅰ型前胶原羧基端肽、血清转化生长因子β1、心肌匀浆上清羟脯氨酸浓度均有不同程度升高;晚期(14天)比早期(7天)升高明显。
3.脓毒症时,心肌胶原容积分数(CVF)和心肌内血管周围胶原面积(PVCA)有不同程度升高;光镜下心肌纤维呈灶性断裂、坏死、空泡变性、嗜酸性变、肌膜细胞增生、肌浆溶解、间质水肿、炎性细胞增多、间质片状纤维增生等;电镜下线粒体明显增多、排列紊乱、部分线粒体嵴断裂、溶解;间质局部炎细胞增生、胶原增多、纤维母细胞增生。
4.丹芪和肝颗粒干预组大鼠的心肌纤维化相关因子和病理的损害均轻于脓毒症组大鼠。
结论:
1.脓毒症早期存在心肌间质改变即心肌间质纤维化,随病程时间进展,脓毒症大鼠血流动力学及心功能有所恢复,但心肌纤维化改变更明显。
2.脓毒症早期心肌纤维化程度与脓毒症病情程度相关,脓毒症越严重,心肌纤维化改变越明显。
3.心肌纤维化不是脓毒症早期血流动力学改变和心脏功能改变的主要因素。
4.脓毒症大鼠心功能情况与是否用丹芪和肝颗粒干预无关。
5.丹芪和肝颗粒对心肌纤维化改变具有保护作用,但对不同致纤维化因子的作用及影响程度不同,且对脓毒症不同病情程度影响不同,并不能完全阻止心肌纤维化的进展。