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背景:肺癌目前是最常见的恶性肿瘤之一,预计在未来相当长一段时间内,肺癌的发病率和死亡率仍会持续上升。非小细胞肺癌(NSCLC)是肺癌最常见的病理类型。近年来对于肺癌的研究已有了相当进展,但肺癌的发病机制至今尚未阐明,相当一部分患者在发现时已失去了积极治疗的机会,NSCLC患者在诊断时有2/3已经超越了手术切除的范围,1/2已经存在临床或潜在的播散。循环核酸的发现对于肺癌的基础研究和临床工作都有着重要意义。p53基因是人类肿瘤中最常变化的抑癌基因,也是可用于检测循环核酸的肿瘤特异性基因。对于循环核酸国外研究较热,国内相关报道不多,有关NSCLC患者血浆循环核酸p53基因突变的分析国内未见报道。
目的:探讨应用聚合酶链反应(PCR)单链构象多态性分析(SSCP)检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆循环核酸p53基因突变检测的可行性,明确NSCLC患者血浆循环核酸p53基因突变的检出率,对正常人与NSCLC患者血浆循环核酸p53基因突变进行比较,分析NSCLC患者血浆循环核酸p53基因突变与临床病理特征之间的相关性,研究NSCLC患者血浆p53基因突变对NSCLC发生、发展和预后估计的意义。
方法:采集2003年7月~2004年4月在我院肿瘤内科、呼吸内
科住院的60例NSCLC患者血浆标本,并取健康人血浆10份设正常对照(由本院输血科提供),参照试剂盒进行循环DNA的抽提,应用PCR扩增p53基因外显子5~8,并用SSCP分析产物突变情况,观察结果用SPSS10.0统计软件行X〈2〉分析,分析结果再与各生物参数进行相关研究。 结果:10例健康人血浆循环核酸p53基因突变检测结果均为阴性,60例NSCLC患者血浆中p53基因5~8外显子突变测定的结果显示有28例出现突变,占47%(28/60),6例为第6外显子,8例为第7外显子,10例为第8外显子。p53基因突变率与临床分期、远处转移、术后肿瘤残留、对治疗的反应显著相关(P<0.05),与年龄、性别、病理分型无关(P>0.05)。
结论:血浆循环核酸p53基因突变在NSCLC中有较高的检出率并与肿瘤的临床分期和远处转移有关,血浆p53基因突变对NSCLC的治疗反应的判断以及远处转移的预测具有重要价值,对NSCLC的早期诊断、病情监测、预后评估都具有指导意义,可望成为检测NSCLC的新型分子标志物。PCR-SSCP分析简便、可靠,可作为检测大量标本的突变的可行性的方法。
主题词:非小细胞肺癌(NSCLC),循环核酸,p53基因突变