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目的：探讨体外培养板层与全层人角膜缘组织对角膜上皮细胞生长动力学与表型的影响。为研究和鉴定角膜缘干细胞(LSCs)存活、增殖和分化情况提供依据。探讨人角膜缘组织体外培养过程中分子标记物，建立科学系统的人角膜缘干细胞体外培养方法。 方法：取黑龙江眼库穿透性角膜移植后剩余人眼角膜缘组20只，采用组织块培养法，分别对全层角膜缘组织、浅板层角膜缘组织及深板层角膜缘组织进行培养，并通过细胞计数、MTT及免疫组织化学染色法对上皮细胞与角膜缘干细胞的形态学、增殖率、生长动力学、表型和免疫细胞化学对角膜缘干细胞体外增殖进行形态学观察、鉴定与评估。 结果：人角膜缘干细胞体外原代培养，实验用人眼球20只，有16只培养成功，2只合并真菌污染，2只细胞不贴壁。组织块静置2h后贴壁良好，3～4d细胞从组织块边缘萌出，7～10d细胞出现生长高峰，12～14d形成良好的细胞单层。细胞形态呈多边形、圆形、卵圆形和梭形。深板层角膜缘上皮细胞增殖率为17％、全层角膜缘上皮细胞增殖率为41％、浅板层角膜缘上皮细胞增殖率为86％(p=0.0001)；细胞计数百分比分别为1.7％、4.7％和8.9％(P<0.001)；P63、ABCG2在浅板层角膜缘组织培养过程中高表达，在全层角膜缘组织培养过程中弱表达，在深板层角膜缘培养上皮细胞中表达较少、无表达。在浅板层角膜缘组织培养及全层角膜缘组织培养中p63α54％/0％(P<0.001)；波形蛋白ABCG2，5％/0％(P=0.1)。 结论：人角膜缘组织体外培养过程中，浅板层角膜缘干细胞增殖率优于全层角膜缘干细胞培养及深板层角膜缘干细胞培养，形态更接近角膜上皮细胞，能显著增加角膜上皮细胞体外培养增殖百分率，提高生长动力学活性，高表达角膜缘干细胞特异性标记物，并降低成纤维细胞污染，更好的保存前体干细胞，促进角膜细胞上皮化，应用20％胎牛血清1640培养液组织培养的方法获得的原代培养细胞具有与正常角膜缘干细胞相一致的生物学特性。