大豆孢囊线虫病(SCN)抗源cDNA文库的构建及R基因类似物的克隆分析

来源 :中国农业科学研究院 中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ydy611
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大豆孢囊线虫病是大豆生长过程中最具破坏力的病害之一.抗大豆孢囊线虫病的研究一直是大豆抗病育种的重要内容.大豆孢囊线虫生理小种多达十几种,大豆对其抗性也表现为多位点抗性,这都给抗孢囊线虫病研究带来困难.近年来,各种植物来源的不同抗病基因的克隆使植物抗病机理研究进入分子水平,这些抗病基因在结构上具有极大的相似性,并为抗病基因的克隆提供了新的思路.该文综述了抗病基因的相似结构及其可能的抗病机理.制作了对大豆孢囊线虫各种生理小种均具有优良抗性的抗源灰布支黑豆的cDNA文库,库容量为1.74×10<5>pfu,重组率为87.3﹪,为今后克隆SCN基因创造了条件.利用以抗病基因保守结构为依据设计的两对引物(其中一对为简并引物)对大豆总DNA进行PCR搜寻,寻找大豆抗孢囊线虫病相关的抗基因类似物,获得8个DNA片段,克隆了四个片段并命名为RGA300、RGA450、RGA900,简并引物扩增出一条差别片段,克隆并命名为RGA500.该文还就RGA500作为基于PCR的STS标记使用进行了讨论.
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