目的:　　Oblongifolin C(OC)和Guttiferone K(GUTK)是藤黄属植物中的重要化合物，具有良好的抗癌活性。OC和GUTK这两个化合物同时存在于云南藤黄Garciniayunnanensis Hu植物中，并且含量非常高。两个化合物结构上只有一个异戊二烯的差异，但两者作用机制有很多不同之处。因此研究富含OC和GUTK的提取物，研究它们之间相互作用，这对于合理开发云南藤黄非常重要。本课题主要研究云南藤黄果实中主要化学成分OC和GUTK合用的抗肿瘤作用机理。　　方法:　　云南藤黄乙醇提取物对HCT116细胞作用机理研究:用MTT检测云南藤黄果实的乙醇提取物在HCT116细胞上存活率，用流式细胞术检测云南藤黄果实的乙醇提取物sub-G1峰比值。Western blot检测云南藤黄果实的乙醇提取物对JNK的磷酸化、凋亡相关蛋白PARP、caspase3和自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p62的表达变化。　　OC和GUTK合用作用机理研究:用MTT和克隆形成实验检测OC和GUTK合用对HCT116细胞存活率和抑制增殖的作用。PI染色法通过流式细胞术检测OC和GUTK合用对sub-G1峰的影响，经AnnexinⅤ-FITC/PI双染后通过流式细胞术检测OC和GUTK合用诱导的凋亡。Western blot检测OC和GUTK合用对JNK、凋亡相关蛋白PARP、caspase3和自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p62的变化。使用荧光显微镜加入DCFH-DA探针检测OC和GUTK合用产生的活性氧(ROS)。比较OC和GUTK在营养缺乏条件下与完全培养基条件下的不同效果。　　结果:　　云南藤黄乙醇提取物对HCT116细胞作用机理研究:MTT结果表明，云南藤黄果实的乙醇提取物GYFB（含OC和GUTK部分）呈剂量依赖性的抑制了结肠癌HCT116细胞的生长。流式检测结果表明，GYFB在10μg/ml下诱导sub-G1期细胞增多，表明细胞发生死亡。Western blot实验结果表明，GYFB作用48h能增加casapse3和PARP的裂解;增加LC3Ⅱ的蛋白水平，降低p62的蛋白水平和增加P-JNK蛋白的表达。并且在营养缺乏时比完全培养基条件下，GYFB作用更强，表明自噬在调节GYFB介导的细胞死亡过程中起到了重要作用。　　OC和GUTK合用作用机理研究:MTT结果表明，化合物OC和GUTK合用，能够呈剂量依赖性的抑制结肠癌细胞的生长。克隆形成实验结果表明，OC和GUTK合用能明显抑制克隆形成。流式检测结果表明，OC和GUTK在7.5 uM浓度下合用比单用具有更强的促进细胞死亡的作用，可使sub-G1期细胞增加到约45％。Western blot的结果表明，OC和GUTK在7.5μM浓度下合用48h能增加casapse-3，和PARP的裂解;增加LC3Ⅱ的蛋白水平，降低p62的蛋白水平和增加P-JNK蛋白的表达。荧光显微镜下观察发现OC和GUTK在7.5μM浓度下合用能促进细胞内ROS的产生。并且在营养缺乏的条件下OC和GUTK在2μ压浓度下合用3h呈现出比完全培养基条件下更强的作用，表明自噬在OC和GUTK合用介导的细胞死亡过程中也起到了重要作用。我们还使用了凋亡抑制剂Z-VAD-fmk和自噬抑制剂HCQ在完全培养基和营养缺乏条件下进行检测。Z-VAD-fmk能够使OC和GUTK合用时肿瘤细胞凋亡减少，结果表明在正常培养基条件下或在营养缺乏的条件下，Z-VAD-fmk都可以阻止肿瘤细胞发生凋亡。HCQ在营养缺乏的条件下能够使OC和GUTK合用时肿瘤细胞凋亡减少，结果表明HCQ能阻止了在营养缺乏的条件下肿瘤细胞的死亡，而在正常完全培养基中无明显作用。　　结论:　　OC和GUTK是云南藤黄发挥抗肿瘤作用的主要活性成分，OC和GUTK合用时具有促进结肠癌细胞凋亡的作用。