论文部分内容阅读
鸡血藤是临床常用的藤类药物，具有活血化瘀的功效。本课题以鸡血藤为研究对象，开展包括前处理、组分制备、活性筛选以及质量评价的系统研究工作。 论文首先建立了鸡血藤黄酮类组分(FSC)的纯化方法。依次用明胶法去除鞣质，用色谱法除小分子糖，使色谱基线漂移和样品状态得到明显改善。制备了FSC以及5个筛选组分（F1至F5），为心血管活性筛选提供组分资源。 在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)体外模型实验中，促增殖实验和划痕实验被用于评价FSC的促血管新生活性。促增殖实验显示FSC可显著提高细胞存活率，并且存在剂量依赖关系。划痕实验证明了该组分可促进细胞的迁移。细胞增殖实验对筛选组分F1至F5的评价结果显示，其活性成分集中于F3、F4、F5中。此外，FSC对溶血性磷脂酰胆碱(LPC)和H2O2诱导的HUVECs凋亡损伤具有一定的保护作用。 在斑马鱼体内模型实验中，FSC在1μg/mL给药浓度下即可显著恢复(P＜0.01)被内皮细胞生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(VRI)抑制的节间血管(ISVs)，并具有浓度依赖性关系，在30μg/mL给药浓度达最好效果，与VRI模型组相比可修复80％被抑制的ISVs。健康正常斑马鱼模型实验证明FSC可明显促进肠下静脉血管(SIVs)增粗及出芽。采用以上模型进一步对F1至F5进行活性筛选，结果表明主要的活性成分集中于F3、F4、F5，与体外模型实验筛选结果一致。 对FSC进行质量评价，测得其中总黄酮含量为56.36％，采用液质联用法对活性组分F3、F4、F5进行化学表征，有利于阐明鸡血藤中促血管新生活性物质基础。