目的：铅是一种广泛存在自然界且在人类生产生活中常见的有毒重金属，可对全身各个系统造成损伤。铅具有一定的致突变致癌能力，国际癌症组织将其归为IIB类致癌物。研究报道，铅、砷、镉等多种重金属与肺癌的发生发展具有一定关联，进一步研究发现，砷和镉可通过细胞膜表面雌激素受体(estrogen receptors， ERs)激活细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase，ERK)通路促进人肺癌细胞的增殖。但是，铅是否具有同样的作用仍不明确。为此，本研究以人类非小细胞肺癌细胞系A549细胞为研究对象，通过使用雌激素(17β-estradiol，E2)，ER抑制剂氟维司群(fulvestrant，ICI)和ERK信号通路的抑制剂PD98059等药物干预方式，探究ER/ERK通路在铅促肺癌细胞增殖中的作用。
　　方法：使用不同浓度醋酸铅(lead acetate，PbAc)(0.2、1或5μmol/L)处理A549细胞，染毒开始后即采用实时无标记动态细胞分析技术(real time cell analysis， RTCA)测定细胞增殖情况，并确定后续染毒浓度；使用ICI(5μmol/L)、PD98059(50μmol/L)与PbAc(1μmol/L)共处理细胞，并以50nmol/LE2和50nmol/LE2+PD98059处理为对照，RTCA法检测细胞增殖；PbAc(1μmol/L)和E2(50nmol/L)染毒不同时间(0、5、10、15、20、30、45、60或90min)后采用WesternBlot检测细胞中p-ERK1/2和ERK1/2蛋白含量；使用ICI(5μmol/L)、PD98059(50μmol/L)分别预处理细胞1h、6h，然后PbAc(1μmol/L)处理90min，WesternBlot检测p-ERK1/2和ERK1/2的蛋白含量；采用免疫荧光法检测不同处理的细胞中Ki67和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)表达情况；采用单细胞平板克隆实验检测细胞克隆形成能力。
　　结果：1.低剂量PbAc(0.2μmol/L或1μmol/L)处理可以升高细胞指数(cell index，CI)，而5μmol/L的PbAc处理则降低CI。结果表明高剂量铅暴露可导致A549细胞损伤，而低剂量铅暴露可以促进细胞增殖；2.PbAc(1μmol/L)可升高p-ERK1/2蛋白含量，且在染毒90分钟时达到峰值(P<0.05)；使用PD98059或ICI预处理细胞则可导致p-ERK1/2蛋白含量明显降低(P<0.05)。表明，铅暴露可激活ERK通路，且该激活作用依赖于ER；3.免疫荧光实验显示，在PbAc(1μmol/L)处理组中，Ki67和PCNA的阳性率高于对照组(P<0.05)；与PbAc(1μmol/L)组相比，ICI+PbAc和PD98059+PbAc组别的Ki67和PCNA阳性率明显降低(P<0.001)；4.单细胞平板克隆实验显示，使用PbAc(1μmol/L)的处理组克隆形成率显著高于对照组的克隆形成率(P<0.05)；与PbAc(1μmol/L)组相比，再加入ICI和PD98059的组的克隆阳性率均降低(P<0.001)。
　　结论：低浓度铅染毒能够促进A549细胞的增殖，其机制是铅可刺激雌激素受体进而激活ERK1/2信号通路，最终诱导细胞增殖。