背景与目的： 子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)由于其造成患者不孕及生活质量下降而日益受到人们的重视,其发病率呈逐年增高的趋势。虽然EMs为良性疾病,但它具有类似恶性肿瘤的组织侵袭和血管生成能力,其发病机理至今未明。既往为多数研究者所接受的是Sampson的经血逆流种植学说,但是近年来研究证实在周期性行经的妇女中,经血逆流至盆腔是普遍的生理现象,而其中仅有约10％的妇女发生EMs,这说明EMs的发生与患者自身的机体状况有关。随着分子生物学的发展和血管生成理论的进一步研究,越来越多的证据表明血管生成不仅在正常月经周期子宫内膜的生长修复中起作用,而且在EMs的发生发展中起着重要作用。 血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)主要由血管内皮细胞分泌,并在成人卵巢、胎盘和子宫等组织中表达。酪氨酸激酶受体-2(tyrosine kinase with immunoglobin and epidermal growth factor homologydomain 2,Tie-2)是内皮细胞特有的激酶受体,其主要的配基为血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)和Ang-2。在EMs的发病过程中,它们可能参与了新血管形成的过程,体外培养研究显示Ang-2在其中可能占主导地位。本研究采用免疫组织化学方法检测Ang-2及受体Tie-2在正常子宫内膜、EMs患者的在位内膜和异位内膜中的表达,分析其表达差异及相关性,并探讨二者在EMs发生发展中的作用。 材料与方法： 1、研究对象 选取2006年1月～2007年10月在广州医学院附属广东省妇儿医院妇科住院接受手术、且病理检查证实为EMs患者60例作为研究组(EMs异位内膜组、EMs在位内膜组),EMs在位内膜中增殖期33份,分泌期27份,内膜分期根据苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色切片确定。EMs分期按1985年修正后的美国生殖协会分期标准(AFS-r)分期,I、II期的患者24例,Ⅲ、IV期患者36例。 选取同期因不孕症、单纯性卵巢囊肿住院行腹腔镜手术患者的子宫内膜组织蜡块标本,病理检查证实为正常子宫内膜的病例36例作为对照组(正常子宫内膜组),其中增殖期23例,分泌期13例。所有病例无内分泌疾病、妇科恶性肿瘤、生殖道炎症及放置宫内节育器等史,术前6月无甾体类激素用药史。两组患者的年龄、孕产次、避孕、宫腔操作情况比较,差异无统计学意义。 2.实验方法 取上述各组内膜的石蜡包埋组织进行实验研究,1)组织学观察,由2名经验丰富的病理科医生查阅HE片,分为研究组及正常对照组。蜡块重新切片贴于硅化玻片；2)用免疫组织化学SP法检测Ang-2及Tie-2在各组内膜组织中的表达情况。兔抗人Ang-2及Tie-2多克隆抗体(即用型)和即用型免疫组织化学SP试剂盒均购自武汉博士德生物工程公司。实验步骤按试剂盒说明书进行。 3.统计学方法 应用SPSS12.0统计软件对数据进行统计学处理,x2检验对所得结果进行分析,P<0.05具有统计学意义。 结果： 1.Ang-2主要表达于腺上皮细胞和血管内皮细胞,少数表达于间质细胞。Ang-2在EMs异位内膜、在位内膜的阳性表达率分别为73.3％和68.3％,明显高于正常对照组(其阳性表达率为41.7％),差异均有显著性,P<0.05;在位内膜同异位内膜间比较差异无显著性,P>0.05;EMs在位内膜组分泌期的阳性表达率高于增殖期,P<0.05;正常对照组增生期的阳性表达率高于分泌期,P<0.05。Ang-2在EMs在位内膜组、正常对照组的表达均随月经呈周期性改变,差异均有显著性。 2.Tie-2主要表达于腺上皮细胞和血管内皮细胞,Tie-2在EMs异位内膜、在位内膜的阳性表达率分别为68.3％和63.3％,36例对照组阳性率为38.9％,EMs组异位内膜和在位内膜Tie-2的表达明显高于正常对照组,和对照组比较均有显著性差异,P<0.05;EMs患者异位及在位内膜比较差异无显著性,P>0.05;Tie-2在正常子宫内膜、EMs在位内膜中的表达具有周期性,均为增生期高于分泌期,P<0.05,差异均有显著性。 3.Ang-2、Tie-2在Ⅰ、Ⅱ期EMs患者异位及在位内膜中的表达水平与Ⅲ、Ⅳ期EMs患者异位及在位内膜中的表达水平相比较差异均无显著性,P>0.05。 结论： 1.Ang-2、Tie2二者在EMs患者异位及在位内膜中的表达高于正常内膜,提示EMs患者异位及在位内膜中血管生成活跃,导致异位病灶组织中的血管数增加。 2.EMs患者异位内膜中Ang-2、Tie-2的表达与在位内膜中的表达相比较无明显差异,说明异位内膜和在位内膜可能具有组织同源性。 3.Ang-2在EMs在位内膜组分泌期的阳性表达率高于增生期,说明可能分泌期内膜侵袭能力增强,更容易随经血逆流在盆腹腔等处形成新生血管而种植生长。Tie-2在EMs在位内膜组增生期的阳性表达率高于分泌期,提示在增生期血管生成更为活跃。 4.Ang-2、Tie2在Ⅰ、Ⅱ期EMs患者异位及在位内膜中的表达水平与Ⅲ、Ⅳ期EMs患者异位及在位内膜中的表达水平相比较差异均无显著性,提示Ang-2及Tie-2的表达水平与EMs病情的严重程度无明显相关。