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目的：
通过检测子痫前期患者APOE基因和纤维蛋白原-455基因分析其基因多态性与患者血压、血脂、纤维蛋白原水平等的关系,探讨广东地区汉族孕妇中APOE基因和β-纤维蛋白原-455G/A基因多态性及与子痫前期发生的关系。
材料与方法：
1.研究对象
选取年龄为23-35岁,初婚初孕妇,无免疫性疾病及遗传性疾病史,无输血史,无亲缘关系的广东籍,汉族人。分组如下：病例组：子痫前期患者(参照乐杰主编的《妇产科学第六版》诊断标准)96人及其胎儿。对照组：正常妊娠的孕妇(无任何病理妊娠)98人及其胎儿。
2.实验方法
入院后取孕妇空腹静脉血(排除进食及其他因素影响)4ml,2ml注入干燥管,分离血清,剩余2ml注入EDTA抗凝管,于分娩后抽取脐血2ml,注入含有EDTA的抗凝管中混匀,存放入-80℃冰箱。
1)、血清送本院检验科,采用日立全自动生化分析仪测定血脂指标(TG、TC、HDL-C、LDL-C)及纤维蛋白原浓度。
2)、基因分型按经典的酚/氯仿法抽提白细胞基因组DNA,PCR法对基因进行扩增,Hha内切酶酶切,聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物及紫外透射仪下观察不同基因分型。
3.统计分析
所有资料经过Microsoft Excel软件建立数据库,所获的数据采用spss 11.0软件分析处理。基因频率采用基因计数法,根据Richard的方法计算等位基因频率=(2×纯合子数+杂合子数)/(2×受检人数)×100％。病例组和对照组均进行Hatdy-Weinberg遗传平衡检验,基因型和等位基因频率比较用x2检验,计量资料经过方差齐性检验后用t检验。所有的计量值均采用均数±标准差(X±S)来表示。所有的统计检验均为双侧概率检验(α=0.05),P<0.05具有显著性统计学差异。
结果：
1.妊娠妇女存在生理性高血脂变化,子痫前期患者脂代谢在妊娠基础上进-步发生异常改变,子痫前期血脂代谢紊乱的主要特征是具有血管破坏作用的TC、TG、LDL-C显著升高：而具有血管保护作用HDL-C显著下降(P<0.05)。
2.ApoE等位基因频率分布分别为ε(5.7％),ε3(85.8％),ε4(8.5％)。在不同的ApoE基因型组,TC、TH、HDL-C和LDL-C水平不同,并有显著性差异(P<0.01),TC,TH和LDL-C水平均按E3/4+E4/4组>E3/3组>E2/2+E2/3组的顺序减少,HDL-C水平按上述顺序增加。E3/4+E4/4组的TC,TH和LDL-C最高,HDL-C水平最低(P<0.01)。
3.子痫前期组ε3等位基因频率80％,明显低于对照组92％,ε4等位基因频率分13％,明显高于对照组的4％,差异有明显统计学意义(P<0.01)。提示ε4等位基因可能是子痫前期的遗传易患因子,而ε3等位基因具有保护作用。
4.子痫前期组胎儿ε3/3基因型明显低于对照组,E3/4基因明显高于对照组(P<0.01),推测胎儿ε4等位基因的携带在子痫前期的发病中起一定的作用。
5.子痫前期患者血浆纤维蛋白原水平显著高于正常妊娠,(p<0.05)。
6.Bβ-FIB-455G/A基因多态性GA+AA等位基因携带者血浆纤维蛋白原水平明显高于GG等位基因者(p<0.05),可见A等位基因与高纤维蛋白原水平相关。A等位基因频率及GA、AA基因型在子痫前期组和对照组间无明显区别(P>0·05)。
结论：
1.子痫前期人群中,ApoE基因型仍以E3/3型为最多,但比正常人群基因频率明显下降,E4/3型比正常人群有显著上升。ApoE/ε4等位基因是一个子痫前期的遗传危险因子。ApoE/ε4等位基因与子痫前期患者高脂血症有相关性。
2.胎儿ε4等位基因的携带在子痫前期的发病中起一定的作用。
3.Bβ-FIB-455G/A基因多态性A等位基因可能不是子痫前期的遗传易感基因,但与子痫前期患者血浆高纤维蛋白原水平相关。