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背景和目的：
心脏骤停后心肺复苏中脑功能的恢复是衡量复苏成败的关键,复苏后的脑损伤是心跳骤停复苏后院内死亡率高的主要原因,因此,脑复苏已经成为心肺脑复苏研究中的热点之一。心跳骤停后神经元缺氧损伤是全脑缺血缺氧性脑损害的重要病理生理过程,但是目前对于心搏骤停后脑缺血缺氧损害的机制仍缺乏足够的了解,脑复苏的治疗尚没有特效的药物,主要采取综合疗法、治疗性亚低温、营养神经元等尽最大限度的保护脑功能。近年有学者通过研究发现,δ亚型阿片受体(delta ppioid receptor,DOR)与多种器官的缺血-再灌注损伤有密切关系,随着研究的深入,发现δ阿片受体有显著的神经保护作用,并与神经元缺血缺氧损伤有密切的关系。本研究旨在：(1)通过研究急性全脑缺血时DOR蛋白表达的变化而研究其与脑损伤的关系；(2)通过再灌注时DOR蛋白表达的变化而研究其保护缺血缺氧神经元的机制,进一步探究DOR在此过程中其可能发挥的作用及意义,期望为心跳骤停后脑复苏开发特异性药物提供新的线索和依据。
方法：
30只健康Sprague-Dawley(SD)大鼠,雌雄不限,随机分成三组：假手术组(n=10)、全脑缺血组(n=10)和缺血再灌注组(n=10),按照二血管阻断加低血压法分别建立急性全脑缺血及再灌注大鼠模型,模拟心跳骤停引起的全脑缺血与再灌注损伤。脑缺血组血压维持在35-40mmHg左右时夹闭双侧颈总动脉,并注意观察双侧瞳孔,夹闭双侧颈总动脉15分钟后处死大鼠取脑组织。缺血再灌注组行全身低血压后夹闭双侧颈总动脉,15分钟后松开血管夹,并回输血液及液体使平均动脉压恢复至缺血前水平,再灌注时间为2小时,之后处死大鼠。所有大鼠取脑组织后,左大脑置入含中性福尔马林的标本瓶内固定待作病理及免疫组化；右大脑置入干净标本瓶内-70℃冻存待作DOR的WESTERN BLOTTING检测及S100B的ELISA测定。留取的大脑病理标本经石蜡包埋切片后,用苏木素-伊红(hematoxylin-eosine,HE)染色法作脑组织病理切片镜检及海马区神经元密度计数、病理照片拍摄；另一部分大脑标本经脱蜡、水化、抗原修复、免疫组织化学染色(Envision法)后观察DOR的定位、照片拍摄。-70℃冻存的大脑标本根据免疫组化定位取部分组织匀浆后按WESTERN BLOTTING方法监测DOR蛋白的表达变化；另一部分组织用S100B蛋白ELISA试剂盒测定S100B值。
结果：
(1)动物实验过程中观察大鼠的瞳孔变化,缺血组颜色苍白且瞳孔开始散大并于整个缺血期维持不变,再灌注组恢复血流灌注后瞳孔颜色即转为鲜红且瞳孔逐渐缩小。脑组织病理显示,缺血组大脑皮层及海马区神经元周围间隙增宽,细胞肿胀,神经元胞浆呈蓝色深染,核固缩,缺血再灌注组神经元损伤较单纯缺血损伤更严重。缺血组海马CA1区正常神经元密度低于假手术组(P<0.05)。
(2)DOR免疫阳性神经元主要分布于大脑皮层、海马区,阳性神经元细胞浆内呈深浅不等的黄色着色。
(3)缺血组S100B蛋白值高于假手术组(P<0.05),而再灌注组S100B的表达高于缺血组(P<0.05)。
(4)缺血组DOR的蛋白表达低于假手术组(P<0.01),可推测该组的DOR表达下调；而缺血再灌注组中的DOR蛋白表达高于假手术组(P<0.05),可认为该组的DOR表达上调。
结论：
(1)全脑缺血缺氧神经元损伤的机制可能涉及DOR的表达下调；
(2)DOR可能通过上调自身蛋白表达以减轻全脑缺血再灌注损伤而起保护作用。