温氏土鸡和白洛克鸡胸肌和腓肠肌卫星细胞增殖能力的比较

来源 :中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woyaojiayou123
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  为研究温氏土鸡和白洛克鸡骨骼肌卫星细胞增殖能力的差异.选取4日龄的温氏土鸡和白洛克鸡作为动物模型,通过原代分离培养分别获得两品种鸡胸肌和腓肠肌骨骼肌卫星细胞.利用HE染色对胸肌和腿肌进行组织学观察,运用Real-time PCR检测两品种鸡胸肌和腿肌中肌肉生长相关基因mRNA丰度的差异;应用免疫组化、流式细胞周期、细胞计数法、MTT法,HE染色法对骨骼肌卫星细胞的增殖能力进行比较.结果显示:(1)4日龄白洛克鸡体重、胸肌重和腿肌重均显著高于温氏土鸡(P<0.05),温氏土鸡和白洛克鸡腿肌肌纤维横切面积显著高于胸肌,而肌纤维密度显著低于胸肌(P<0.05).(2)温氏土鸡和白洛克鸡胸肌和腿肌基因表达检测结果显示,两品种腿肌MyoD、MyoG、PCNA、Myostatin、Smad3 mRNA均不同程度高于胸肌;蛋白质合成相关的TOR信号通路中TSC1、Rheb、TOR和S6K mRNA丰度均显著高于胸肌(P<0.05),4EBP1 mRNA丰度差异不显著;蛋白质降解相关基因Atrogin mRNA丰度显著高于胸肌(P<0.05),MuRF1 mRNA丰度在部位间差异不显著.(3)白洛克鸡腓肠肌卫星细胞在接种72h后增殖数目和增殖能力显著高于胸肌,温氏土鸡腓肠肌卫星细胞则显著低于胸肌(P<0.05);骨骼肌卫星细胞大小则与增殖能力趋势相反,白洛克鸡胸肌卫星细胞大小显著高于腓肠肌(P<0.05),温氏土鸡胸肌卫星细胞大小则显著低于腓肠肌(P<0.05);温氏土鸡和白洛克鸡的胸肌卫星细胞和腓肠肌卫星细甫种72h后流式细胞周期检测显示,在S期和G2/M期细胞比例差异不显著(P>0.05);骨骼肌卫星细胞在增殖72h时白洛克鸡腓肠肌卫星细胞中MyoD、Myostatin、Smad3、TOR和S6K mRNA丰度均不同程度显著高于胸肌(P<0.05),其他上述基因mRNA丰度则差异不显著(P>0.05);温氏土鸡胸肌卫星细胞中上述基因mRNA丰度均不同程度高于腓肠肌,但差异不显著(P>0.05).结果表明,白洛克鸡胸肌和腿肌的生长发育速度快于温氏土鸡,可能与骨骼肌卫星细胞增殖能力和细胞大小有关,其分子机制涉及生肌因子家族、Myostatin信号通路和mTOR信号通路相关基因表达的差异.
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