论文部分内容阅读
为研究温氏土鸡和白洛克鸡骨骼肌卫星细胞增殖能力的差异.选取4日龄的温氏土鸡和白洛克鸡作为动物模型,通过原代分离培养分别获得两品种鸡胸肌和腓肠肌骨骼肌卫星细胞.利用HE染色对胸肌和腿肌进行组织学观察,运用Real-time PCR检测两品种鸡胸肌和腿肌中肌肉生长相关基因mRNA丰度的差异;应用免疫组化、流式细胞周期、细胞计数法、MTT法,HE染色法对骨骼肌卫星细胞的增殖能力进行比较.结果显示:(1)4日龄白洛克鸡体重、胸肌重和腿肌重均显著高于温氏土鸡(P<0.05),温氏土鸡和白洛克鸡腿肌肌纤维横切面积显著高于胸肌,而肌纤维密度显著低于胸肌(P<0.05).(2)温氏土鸡和白洛克鸡胸肌和腿肌基因表达检测结果显示,两品种腿肌MyoD、MyoG、PCNA、Myostatin、Smad3 mRNA均不同程度高于胸肌;蛋白质合成相关的TOR信号通路中TSC1、Rheb、TOR和S6K mRNA丰度均显著高于胸肌(P<0.05),4EBP1 mRNA丰度差异不显著;蛋白质降解相关基因Atrogin mRNA丰度显著高于胸肌(P<0.05),MuRF1 mRNA丰度在部位间差异不显著.(3)白洛克鸡腓肠肌卫星细胞在接种72h后增殖数目和增殖能力显著高于胸肌,温氏土鸡腓肠肌卫星细胞则显著低于胸肌(P<0.05);骨骼肌卫星细胞大小则与增殖能力趋势相反,白洛克鸡胸肌卫星细胞大小显著高于腓肠肌(P<0.05),温氏土鸡胸肌卫星细胞大小则显著低于腓肠肌(P<0.05);温氏土鸡和白洛克鸡的胸肌卫星细胞和腓肠肌卫星细甫种72h后流式细胞周期检测显示,在S期和G2/M期细胞比例差异不显著(P>0.05);骨骼肌卫星细胞在增殖72h时白洛克鸡腓肠肌卫星细胞中MyoD、Myostatin、Smad3、TOR和S6K mRNA丰度均不同程度显著高于胸肌(P<0.05),其他上述基因mRNA丰度则差异不显著(P>0.05);温氏土鸡胸肌卫星细胞中上述基因mRNA丰度均不同程度高于腓肠肌,但差异不显著(P>0.05).结果表明,白洛克鸡胸肌和腿肌的生长发育速度快于温氏土鸡,可能与骨骼肌卫星细胞增殖能力和细胞大小有关,其分子机制涉及生肌因子家族、Myostatin信号通路和mTOR信号通路相关基因表达的差异.