【摘 要】
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目的 克隆骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因,并构建重组BMP-2基因真核表达质粒.方法 从兔骨髓细胞中分离提取BMP-2的mRNA,RT-PCR扩增后,克隆入pGEM-T载体,PCR鉴定重组子;酶切下目的 基因BMP-2,再亚克隆入载体pEGFP-C3质粒,酶切鉴定亚克隆重组子并进行DNA序列分析.结果 经过RT-PCR扩增得到BMP-2cDNA条带:PCR扩增鉴定得到pGEM-T-BMP-2
【机 构】
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450052,郑州,郑州大学第一附属医院骨科、河南省高等临床医学重点学科开放实验室,450052,郑州,郑州大学第一附属医院骨科、河南省高等临床医学重点学科开放实验室,450052,郑州,郑州大学第一
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目的 克隆骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因,并构建重组BMP-2基因真核表达质粒.方法 从兔骨髓细胞中分离提取BMP-2的mRNA,RT-PCR扩增后,克隆入pGEM-T载体,PCR鉴定重组子;酶切下目的 基因BMP-2,再亚克隆入载体pEGFP-C3质粒,酶切鉴定亚克隆重组子并进行DNA序列分析.结果 经过RT-PCR扩增得到BMP-2cDNA条带:PCR扩增鉴定得到pGEM-T-BMP-2.酶切鉴定得到亚克隆重组子pEGFP-C3-BMP-2,经测序鉴定证实插入DNA序列与设计完全一致.结论 成功克隆兔BMP-2基因,构建出重组真核表达载体BMP-2,为进一步采用BMP-2基因治疗关节软骨缺损奠定了实验基础。
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