【摘 要】
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将构建的重组逆转录病毒载体PN_2-EPO导入包装细胞PA317中,整合了病毒基因组的PA317细胞能稳定地分泌PN_2-EPO病毒颗粒。将经5-氟脲嘧啶处理的供体小鼠骨髓细胞,在polybrene
【机 构】
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中国医学科学院、中国协和医科大学血液学研究所,中国医学科学院、中国协和医科大学血液学研究所,中国医学科学院、中国协和医科大学血液学研究所,中国医学科学院、中国协和医科大学血液学研究所,中国医学科学院、
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将构建的重组逆转录病毒载体PN_2-EPO导入包装细胞PA317中,整合了病毒基因组的PA317细胞能稳定地分泌PN_2-EPO病毒颗粒。将经5-氟脲嘧啶处理的供体小鼠骨髓细胞,在polybrene存在下,与产病毒的PA317包装细胞共同培养48h后,取悬浮细胞静脉注入受致死剂量照射的同系小鼠体内,10～14天后取脾脏细胞,提取RNA。RNA点杂交表明,EPO基因已在小鼠体内的造血细胞中得到转录表达。
The constructed recombinant retroviral vector PN_2-EPO was introduced into the packaging cell PA317, and the PA317 cells integrated with the virus genome stably secreted PN_2-EPO virus particles. The donor mouse bone marrow cells treated with 5-fluorouracil were incubated with PA317 packaging cells in the presence of polybrene for 48 hours, then the suspension cells were intravenously injected into lethally irradiated syngeneic mice, Spleen cells were taken after 14 days and RNA was extracted. RNA dot blotting showed that the EPO gene has been transcribed in hematopoietic cells in mice.
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