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目的 构建单纯疱疹病毒Ⅱ型(Herpes simplex virus type 2,HSV-2)感染细胞蛋白27(infected-cell protein 27,ICP27)在Vero细胞中的表达载体,并对其表达进行亚细胞定位.方法 用前期构建成功的pCDNA3.0-ICP27及pEGFP-ICP27通过脂质体介导质粒瞬时转染Vero细胞,经Western blot检测ICP27蛋白的表达.并通过荧光显微镜及免疫组化的方法观察ICP27在Vero细胞中的亚细胞定位.结果 ICP27可在Vero细胞中高表达,pEGFP-ICP27转染Vero细胞12h后,就可以在少量的细胞中表达,而在转染后的24h-48h表达量最大.但转染72h后,表达的蛋白含量在细胞中减少.Western blot结果显示,pEGFP-ICP27和pCDNA3.0-ICP27均可表达ICP27,用质粒pEGFP-ICP27转染的Vero细胞,观察荧光却只发现ICP27定位于细胞核中,而用免疫组化方法检测pCDNA3.0-ICP27发现细胞核和细胞质中均有表达.结论 pEGFP-ICP27和pCDNA3.0-ICP27均可成功的使ICP27在Vero细胞中有效表达,且ICP27在细胞核和细胞质中均有表达,但主要表达于细胞核