大肠杆菌细胞色素还原酶CcmH结构和生化特性研究

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大肠杆菌二硫键氧化还原酶CcmH位于内膜,参与细胞色素c的成熟,可能催化还原细胞色素c前体,但具体催化反应的机制不清楚。CcmH氨基端含有氧化还原结构域,活性中心含有CXXC模体,属于硫氧化还原蛋白超家族。为了确定CcmH的跨膜的拓扑结构,采用半胱氨酸定点突变扫描法(SCAM)证明了CcmH是一个五次跨膜蛋白(包括信号肽),氨基端氧化还原结构域和羧基端都位于周质空间。氧化还原电位可以反映氧化还原蛋白的氧化性或还原性强弱,揭示电子传递的方向。利用GSSG/GSH氧化还原系统,计算出氧化还原结构域CcmH19-99的标准氧化还原电势为-230mV,而CcmG(DsbE)为-186mV,表明CcmH是强还原剂,体内电子可能的传递方向是:CcmH→CcmG→细胞色素c前体。
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