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研究心跳骤停后应用低温紧急保存,复苏24h后对脑内硝基酪氨酸(3NT)含量和多聚ADP核糖聚合酶(PARP)活性的影响。
方法成年雄性SD大鼠25只,随机分为对照组(Ⅰ组),75min紧急保存复苏(EPR)组(Ⅱ组)。Ⅰ组为单纯麻醉后取出正常脑组织。Ⅱ组为动物麻醉手术稳定后进入失血性休克阶段(5min);然后应用KCl与Esmolol使心脏停跳(CA),在CA1min进行冰Plasma-lyteA溶液股动脉灌注并结合体表降温,使体温下降至约15℃,直至CA75min;CPB再灌注60min,复温至约34℃;进入ICU阶段(2h),ICU阶段最后15min脱离呼吸机保持自主呼吸,进入体温控制阶段(4h),这两个阶段持续保持低温约34℃;复苏开始后24h取出脑组织,应用WesternBlotting进行脑内3NT与聚腺苷二磷酸核糖基化作用的水平测定。
结果:心跳骤停后应用0.7℃±0.5℃冷溶液灌注使鼓膜温度由36.98℃±0.3℃迅速降至12.28℃±2.3℃,直肠温度由37.48℃±0.4℃降至13.66℃±0.8℃。CPB再灌注1h使左侧鼓膜温度由14.48℃±0.6℃升至32.22℃±1.6℃,直肠温度由14.64℃±0.4℃升至32.42℃±1.3℃,停止CPB时心率278±31.1次/min,血压100.8±23.9mmHg。结束机械通气后心率316±25.1次/min,血压112.6±21.5mmHg,呼吸频率45±10次/min,SPO299.7%±0.2%。Ⅱ组复苏后24hOPC评分为3,NDS评分为53.8%±5.6%。在复苏后24h实验结束后测得脑内3NT含量和PARP活性Ⅱ组高于Ⅰ组。分子量约70kD蛋白的3NT含量在海马、纹状体Ⅰ组与Ⅱ组相比有显著性统计学差异(P<0.05)。分子量约64kD蛋白的聚腺苷二磷酸核糖基化作用在海马Ⅰ组与Ⅱ组相比有显著性统计学差异(P<0.05)。
结论紧急保存复苏对于较长时间的失血性心跳骤停是全新的、有效的治疗方法。在大鼠实验中应用低温进行紧急保存复苏,当鼓膜温度约15℃、心跳骤停75min,产生神经系统损伤。复苏24h后脑内3NT含量和PARP活性较正常脑组织有明显升高,参与低温紧急保存复苏中全脑缺血再灌注损伤的机制。