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背景与目的：目前，卵巢癌的治疗以手术为主，化放疗为辅，近年由于化疗药物的联合应用，使化疗耐药不断出现，限制了疗效的提高，因此寻找提高卵巢癌对化疗药物敏感性的方法，增强辅助治疗的效果，对于改善卵巢癌预后具有十分重要的意义。研究发现黏着斑激酶(FAK)是一种非受体型酪氨酸蛋白激酶，是整合素信号通路的关键信号分子，参与肿瘤的发生、发展，并与肿瘤的化疗耐药密切相关，且已证实FAK在卵巢癌组织中高表达。本实验采用RNA干扰技术，体外设计构建靶向FAK-shRNA质粒沉默卵巢癌细胞FAK基因，检测卵巢癌细胞中FAKmRAN的表达情况，观察FAK mRAN表达是否能被抑制，探讨沉默FAK基因后，癌细胞是否能增强对顺铂和紫杉醇化疗药物的敏感性。
方法：1.构建特异性FAK-shRNA重组质粒(根据FAK mRAN序列体外设计特异性短发卡状RNA(shRNA)插入序列，将其定向克隆入线性化质粒，鉴定插入序列的正确性，构建成FAK-shRNA重组质粒)2.培养卵巢癌HO-8910细胞。3.将体外构建的特异性FAK-shRNA重组质粒转染卵巢癌细胞，以转染无关序列质粒shNC为阴性对照组，观察转染效率。4.采用Real-Time PCR技术测定转染前后细胞FAK mRNA表达情况。5.通过MTT法检测靶向沉默FAK后细胞在顺铂和紫杉醇作用下的抑制情况，计算细胞半数抑制浓度(IC50值)，比较转染前后细胞对顺铂和紫杉醇化疗敏感性的变化。
结果：1.成功将体外构建的特异性FAK-shRNA-2434重组质粒转染入卵巢癌HO-8910细胞，荧光显微镜下观察转染效果，其转染效率达70％-80％以上。2。Real-Time PCR检测显示：FAK-shRNA质粒有效的抑制了细胞FAK mRNA表达，转染48h后FAK mRNA表达抑制率约为69.8％，与空白对照组和阴性对照组相比均具有显著差异(P<0.05)，而空白对照组和阴性对照组相比，组间表达无显著差异(P>0.05)。3.MTT法检测顺铂结果显示：实验转染组细胞的IC50值为0.017μg/mL±0.007，与空白对照组及阴性对照组IC50值相比显著下降(P<0.05)，而空白对照组与阴性对照组相比无显著性差异(P>0.05)；4.MTT法检测紫杉醇结果显示：实验转染组细胞的IC50值为4.09μg/mL±0.41，与空白对照组及阴性对照组IC50值相比显著下降(P<0.05)，而空白对照组与阴性对照组相比无显著性差异(P>0.05)。
结论：靶向FAK基因的RNA干扰载体成功转染卵巢癌HO-8910细胞，有效的抑制了细胞FAK mRNA表达，并能显著促进细胞的抑制率，分别增强了卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇化疗药物的敏感性。