有机溶剂体系中葡萄糖苷酶催化芳基烷醇糖苷化反应的研究

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糖苷酶能一步催化烷醇糖苷化合成单一立体构型的烷基糖苷.该文研究了有机溶剂体系中葡萄糖苷酶催化合成芳烷基糖苷的逆水解反应.以杏仁β-葡萄糖苷酶催化对硝基苯甲醇糖苷化为模型反应,对反应温度、摇床转速、缓冲溶液与有机溶剂的种类和含量进行了系统优化.研究表明:缓冲溶液对反应的初速度有显著影响,在所研究的90:10二氧六环-缓冲溶液单相体系中,以pH 6.0,70 mM的Na<,2>HPO<,4>-KH<,2>PO<,4>为缓冲液时反应初速度最高.缓冲溶液的种类对反应72 h的转化率几乎没有影响.有机溶剂的种类和含量是反应体系的关键参数,二氧六环-缓冲溶液(90%,v/v)的体系中产率最高.在最佳反应体系中研究了反应的热力学平衡,并考察了酶在不同二氧六环含量下的失活情况,表明热力学平衡是限制反应产率的主要因素.增加对硝基苯甲醇的浓度可将合成反应的平衡转化率提高至13.5%.用自制的苹果籽粉作为新的廉价糖苷酶源,在二氧六环-缓冲溶液单相介质体系中制备了一系列对位取代苯甲基β-D-葡萄糖苷和对羟基苯乙基β-D-葡萄糖苷(红景天苷),产率为13.1%至23.1%,其中红景天苷(天然药物有效成分)的分离得率为15.8%,显示了苹果籽粉潜在的应用前景.
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