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目的:本文通过研究基于代谢组学桥本氏甲状腺炎中医证候的差异代谢物,得到特征代谢通路为桥本氏甲状腺炎的中医辨证分型提供依据,以此完善桥本氏甲状腺炎的中医辨证论治理论体系,从而丰富了中医辨证的方法。
方法:1.2019年05月-2019年10月期间筛选桥本氏甲状腺炎患者54例进行中医辨证分型,以健康志愿者10例作为对照。采集血清标本,按照临床分型分为:A组为脾肾阳虚型18例,B组为肝郁气滞型18例,C组为阴虚火旺型18例,D组为健康组10例。
2.上述血清采用超高效液相色谱-质谱分析方法分析代谢产物并采集图谱;
3.利用Progenesis Qi2.0分析软件进行数据预处理,后通过SIMCA-P14.1软件对处理后的数据进行主成分分析、正交偏最小二乘法-模式识别分析、载荷图分析,根据差异权重贡献值(VIP)来筛选潜在的代谢物,根据差异倍数>1.2,且VIP>1.0,p<0.05得出差异代谢物,利用KEGG数据平台分析差异性代谢物的代谢通路差别,并分别研究不同证型桥本氏甲状腺炎血清与健康者的血清代谢差异。
结果:1.质量控制样本主成分分析中可见无离群样本,证明实验系统稳定,数据可靠;
2.从总离子色谱图上能明显看出不同证候间具有代谢差异;
3.主成分分析:四组样本基本处于99%的置信区间内,且各组之间存在区别;
4.脾肾阳虚型桥本氏甲状腺炎与健康组之间,明显存在8种差异代谢物,其中马尿酸、柠檬酸、琥珀酸、植物樵氨醇、棕榈酰卡尼丁5种代谢物对比健康者来说是下调的,酪氨酸、溶血磷脂酰胆碱、苯丙氨酸3种代谢物是上调的。脾肾阳虚型桥本氏甲状腺炎通过磷脂代谢、苯丙氨酸代谢、三羧酸循环与鞘脂代谢4条通路来影响人体代谢;
5.肝郁气滞型桥本氏甲状腺炎与健康者之间存在7组差异代谢物,其中丝氨酸、溶血磷脂酰胆碱、乙酰乙酸、丙酮酸、同型半胱氨酸、N-乙酰氨基6种代谢物对比正常人来说是上调的,脱氧-D-葡糖1种代谢物是下调的。肝郁气滞型桥本氏甲状腺炎通过磷脂代谢、半胱氨酸代谢、三羧酸循环与糖胺合成通路4条通路来影响人体代谢;
6.阴虚火旺型桥本氏甲状腺炎与健康者之间存在11组差异代谢物,其中7种磷脂酰胆碱及氧化型谷胱甘肽8种代谢物对比正常人来说是上调的,磷脂酰胆碱(18∶3)、磷脂酰乙醇胺(20∶1)及肌苷3种代谢物是下调的。阴虚火旺型桥本氏甲状腺炎通过糖基磷脂酰肌醇脂锚生物合成、甘油磷脂代谢、谷胱甘肽代谢、嘌呤代谢4条通路来影响人体代谢。
结论:利用血清代谢组学,得出三种证型与健康组之间均存在差异代谢物;与健康者相对照,脾肾阳虚型共有8种差异代谢物,4条差异代谢通路;肝郁气滞型共有7种差异代谢物,4条差异代谢通路;阴虚火旺型共有11种差异代谢物,4条差异代谢通路。三种中医证候之间存在不同的代谢物,并通过对应的代谢通路影响机体代谢;脾肾阳虚型、肝郁气滞型、阴虚火旺型相同的代谢通路为磷脂代谢;脾肾阳虚型与肝郁气滞型有两条共同的代谢通路:磷脂代谢与三羧酸循环。其差异代谢特征主要表现在脂代谢、氨基酸代谢与三羧酸循环上。本研究从代谢组学的角度,证实桥本氏甲状腺炎不同中医证型之间存在代谢产物和代谢通路差异,为本病的中医辨证客观化提供了依据。
方法:1.2019年05月-2019年10月期间筛选桥本氏甲状腺炎患者54例进行中医辨证分型,以健康志愿者10例作为对照。采集血清标本,按照临床分型分为:A组为脾肾阳虚型18例,B组为肝郁气滞型18例,C组为阴虚火旺型18例,D组为健康组10例。
2.上述血清采用超高效液相色谱-质谱分析方法分析代谢产物并采集图谱;
3.利用Progenesis Qi2.0分析软件进行数据预处理,后通过SIMCA-P14.1软件对处理后的数据进行主成分分析、正交偏最小二乘法-模式识别分析、载荷图分析,根据差异权重贡献值(VIP)来筛选潜在的代谢物,根据差异倍数>1.2,且VIP>1.0,p<0.05得出差异代谢物,利用KEGG数据平台分析差异性代谢物的代谢通路差别,并分别研究不同证型桥本氏甲状腺炎血清与健康者的血清代谢差异。
结果:1.质量控制样本主成分分析中可见无离群样本,证明实验系统稳定,数据可靠;
2.从总离子色谱图上能明显看出不同证候间具有代谢差异;
3.主成分分析:四组样本基本处于99%的置信区间内,且各组之间存在区别;
4.脾肾阳虚型桥本氏甲状腺炎与健康组之间,明显存在8种差异代谢物,其中马尿酸、柠檬酸、琥珀酸、植物樵氨醇、棕榈酰卡尼丁5种代谢物对比健康者来说是下调的,酪氨酸、溶血磷脂酰胆碱、苯丙氨酸3种代谢物是上调的。脾肾阳虚型桥本氏甲状腺炎通过磷脂代谢、苯丙氨酸代谢、三羧酸循环与鞘脂代谢4条通路来影响人体代谢;
5.肝郁气滞型桥本氏甲状腺炎与健康者之间存在7组差异代谢物,其中丝氨酸、溶血磷脂酰胆碱、乙酰乙酸、丙酮酸、同型半胱氨酸、N-乙酰氨基6种代谢物对比正常人来说是上调的,脱氧-D-葡糖1种代谢物是下调的。肝郁气滞型桥本氏甲状腺炎通过磷脂代谢、半胱氨酸代谢、三羧酸循环与糖胺合成通路4条通路来影响人体代谢;
6.阴虚火旺型桥本氏甲状腺炎与健康者之间存在11组差异代谢物,其中7种磷脂酰胆碱及氧化型谷胱甘肽8种代谢物对比正常人来说是上调的,磷脂酰胆碱(18∶3)、磷脂酰乙醇胺(20∶1)及肌苷3种代谢物是下调的。阴虚火旺型桥本氏甲状腺炎通过糖基磷脂酰肌醇脂锚生物合成、甘油磷脂代谢、谷胱甘肽代谢、嘌呤代谢4条通路来影响人体代谢。
结论:利用血清代谢组学,得出三种证型与健康组之间均存在差异代谢物;与健康者相对照,脾肾阳虚型共有8种差异代谢物,4条差异代谢通路;肝郁气滞型共有7种差异代谢物,4条差异代谢通路;阴虚火旺型共有11种差异代谢物,4条差异代谢通路。三种中医证候之间存在不同的代谢物,并通过对应的代谢通路影响机体代谢;脾肾阳虚型、肝郁气滞型、阴虚火旺型相同的代谢通路为磷脂代谢;脾肾阳虚型与肝郁气滞型有两条共同的代谢通路:磷脂代谢与三羧酸循环。其差异代谢特征主要表现在脂代谢、氨基酸代谢与三羧酸循环上。本研究从代谢组学的角度,证实桥本氏甲状腺炎不同中医证型之间存在代谢产物和代谢通路差异,为本病的中医辨证客观化提供了依据。