对四种哺乳动物进行体细胞核移植实验.实验一金黄地鼠体细胞核移植研究.体细胞核移植在啮齿类动物中已进行了广泛的研究,体细胞核移植的小鼠、兔、大鼠都已经出生.金黄地鼠作为一种重要的实验动物,体细胞核移植研究目前还是空白.我们的实验研究了金黄地鼠卵子孤雌激活与体细胞核移植发育情况.孤雌研究表明A23187和电激活可以有效激活金黄地鼠卵子,而SrCl<,2>很难激活金黄地鼠卵子.对培养液进行改进,发现加入雌二醇后可以显著改善孤雌胚胎2-细胞到4-细胞的发育比例.实验二 兔体细胞核在GV,MI与MII卵母细胞胞质重编程的研究.我们将兔的体细胞移植到去核的生发泡卵胞质、MI和MII卵母细胞胞质,观察体细胞核重新修饰过程和重构胚胎发育能力.体细胞核移植到三种胞质后均可观察到微管在凝集的染色体附近进行组装.在MII的卵胞质中可以形成正常的纺锤体,但是MI和GV卵胞质中的大部分核不能够组装正常纺锤体.一部分重构胚胎的染色体弥散存在于胞质中,一部分重构胚胎染色体形成了单极的纺锤体.激活后在三种胞质中均可以观察到类原核出现.以MI和MII卵胞质为受体的重构胚可以发育到囊胚,但是以GV卵胞质为受体的重构胚胎只能发育到4细胞.结果表明卵母细胞在成熟的过程中逐步获得去分化能力,并且生发泡物质对体细胞核重新修饰起着重要作用.实验三 兔体细胞染色体在卵母细胞胞质中分离的研究.利用免疫荧光的方法以CREST患者的自免疫血清对重构卵染色体的动粒进行了观察,发现体外自发成熟的卵母细胞停滞在MII期,动粒呈对状结构排列在纺锤体赤道板两侧.在第一次减数分裂后期,动粒随染色体分离并且沿与纺锤体体轴相垂直的方向整齐排列.将体细胞移植到非成熟的卵母细胞后发现动粒不能正常排列.结果表明体细胞不能够在卵母细胞内完成减数分裂.实验四 山羊体细胞核移植研究.本实验在调整了亚洲黄羊供体细胞和受体卵母细胞的周期后,对核移植重构胚胎发育能力进行观察.实验五 克隆牛过程中电融合条件对附植前胚胎发育影响的研究.实验比较了克隆牛过程中电融合条件对附植前胚胎发育的影响.