低分子量海带岩藻聚糖硫酸酯对大鼠急性心肌梗死的保护作用及其机制研究

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海带(L.japonica),属褐藻门海带目海带科海带属,含有高达3.6%的岩藻聚糖,可用于提取海带岩藻聚糖硫酸酯。岩藻聚糖硫酸酯是一类独特的结合有硫酸基团的多糖,化学组分复杂,结构多样。大量研究发现,不同构造的岩藻聚糖硫酸酯表现出不同的药理活性,主要包括抗凝血、抗炎症、抗病毒、调节免疫力、抗氧化、抗肿瘤等。而且经前期研究,经水解分离获得的低分子量、低硫酸根的岩藻聚糖硫酸酯清除自由基活性更高,经冻干后制成白色粉末。基于岩藻聚糖硫酸酯较好的清除自由基及抗氧化活性,本实验中通过建立大鼠急性心肌梗死模型,从动物整体水平考察低分子量海带岩藻聚糖硫酸酯(LMWF)对其保护作用,并从分子水平初步探究其抗急性心肌梗死可能的机制。  本实验研究中,根据给药剂量不同将大鼠进行分组,分为假手术(Sham)组、模型(AMI)组、单硝酸异山梨酯(IM)组(10 mg/kg)、LMWF100 mg/kg组、50 mg/kg组、25 mg/kg组,造模前每天按剂量灌胃,连续7天,于最后一次给药1h后进行手术建立急性心肌梗死模型。  模型建立后,通过比较各组术前及术后心电图S-T段抬高幅度,测定术后6h各组大鼠血清指标(LDH、CK、GOT、cTn-T)含量、大鼠心肌梗死面积率,心肌组织H-E染色,观察LMWF对急性心肌梗死的保护作用及心肌组织病理形态学变化。  结果显示,LMWF能够降低急性心肌梗死大鼠S-T段抬高幅度,降低血清中CK、GOT、LDH和cTn-T含量,减小心肌梗死面积,改善心肌纤维轻度胀、炎细胞浸润以及局灶性坏死的程度。  通过测定各组大鼠心肌组织中SOD、GSH-PX活性和MDA水平,检测心肌线粒体活力及肿胀度,及线粒体内SOD活性和MDA、Ca2+含量,TUNEL染色测定心肌细胞凋亡率及心肌组织中Bcl-2和Bax表达,观察LMWF的抗心肌细胞凋亡作用及其可能的机制。  结果显示,LMWF能够升高心肌细胞中抗氧化酶SOD、GSH-PX活性并降低MDA含量,恢复线粒体膜肿胀程度及活力,增强线粒体中SOD、GSH-PX活性,抑制线粒体内钙超载,上调Bcl-2表达、下调Bax表达,降低心肌细胞凋亡率。  综上,LMWF对大鼠急性心肌梗死具有保护作用,且随LMWF给药剂量增加,保护作用增强。机制可能是通过增强细胞及线粒体的抗氧化作用,减轻细胞及线粒体的Ca2+超载、抑制线粒体损伤等三个方面来抑制心肌细胞凋亡,减少心肌组织细胞丢失。
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