巨尾桉化学成分及化感活性研究

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目的:本实验以巨尾桉作为研究对象,对其根的化学成分进行分离和鉴定,对其叶、枝、根系分泌物中的挥发性成分进行测定,为进一步研究其化感活性打下基础。通过生物活性测定实验,测试巨尾桉各部位水提取物对莴笋、白菜和黄瓜种子发芽率的化感影响。通过气质联用(GC-MS)色谱技术,对比研究不同生长年限巨尾桉叶片和不同品种桉树叶片的挥发性成分差异及相对含量差别。   方法:①巨尾桉根原料采用甲醇回流提取,乙酸乙酯萃取,提取物采用D101大孔吸附树脂、MCI、硅胶、C18反相柱色谱和SephedexLH-20凝胶色谱等分离技术,分离纯化巨尾桉根中单体成分。所得到的单体利用物理方法、核磁共振H谱和核磁共振C谱进行结构鉴定。②对巨尾桉叶片、枝条及根系分泌物以水作为溶剂加热提取,得到的浸提液稀释成0.005g/mL、0.01g/mL和0.05g/mL,蒸馏水作为对照,以培养皿滤纸法测定不同浓度不同器官提取液对莴笋、黄瓜和白菜3种种子发芽率的影响。③利用水蒸气蒸馏法提取一年生至五年生巨尾桉叶片挥发性成分,用正己烷对油水混合物进行萃取,得到巨尾桉叶片精油,进行GC-MS色谱仪分析其挥发性成分及相对含量变化。④利用水蒸气蒸馏法提取巨尾桉、巨桉、柳桉、邓恩桉、粗皮桉、赤桉和三年生巨尾桉叶片挥发性化学成分,用正己烷萃取得到叶片挥发油,进行气相-质谱联用技术分析,通过查阅文献及NIST05谱库核对,根据分子裂变规律确定挥发油中化学成分及相对含量差异。⑤以正己烷为提取溶剂,对巨尾桉根、三年生巨尾桉根、其根系土壤及对照土壤超声提取,得正己烷提取物通过GC-MS确定其化学成分,根据根、根系土壤和对照土壤中成分比对,推测根系分泌到土壤中的物质。   结果:①从巨尾桉根中分离得到6个化合物,鉴定了其中5个化合物分别为:3-O-甲基鞣花酸4-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、熊果酸、白桦脂酸、β-谷甾醇、没食子酸。②巨尾桉叶片水浸提液浓度达到0.01g/mL、枝条提取液浓度到达0.05g/mL时,对莴笋、白菜和黄瓜等3种蔬菜种子发芽率有影响,与对照相比有显著性差异。根部水提取物浓度达到0.05g/mL时对黄瓜和莴笋种子发芽率有显著性差异影响。③一年至五年生巨尾桉叶片挥发性成分有差异,其中的每个主要成分都会在生长的某个时期相对含量急剧升高,并且达到五年内的最高值时开始下降。④六种桉树品种中桉叶油醇和α-蒎烯含量都占有主要地位,挥发油中成分主要以半萜、倍半萜、氧化半萜和氧化倍半萜为主。⑤根系土壤中α-蒎烯、桉叶油醇、邻伞花烃和异十二烷在三年生和成熟巨尾桉叶中都有发现,推测其可能为巨尾桉中根系分泌成分。   结论:分离并鉴定了巨尾桉根主要化学成分及其结构,弄清了巨尾桉叶、枝、根系土壤中的主要挥发性成分,测定了不同桉树品种及同一巨尾桉品种不同生长年份的桉树叶中挥发性成分异同及相对含量差别。研究并证明了巨尾桉叶片、枝、根水浸提液对莴笋、白菜和黄瓜等3种蔬菜种子发芽率的影响。为巨尾桉人工林的生态环境效应提供化学物质证据,促进其可持续发展。
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