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近年，研究认为石英所致的炎性反应是肺部慢性阻塞性疾病、肺纤维化甚至肺癌的关键效应。石英可以通过K+外流激活NLRP3炎性体（NLRP3 inflammasome）从而介导炎性反应的发生。在K+外流过程中K+通道是否发挥作用？若是，是何种亚型的K+通道？有研究表明，石英作用后，肺泡巨噬细胞的外向延迟整流K+通道（Outwardly rectifying potassium(Kor) channel）开放增加，胞内Ca2+浓度增高。然而，阻断K+通道使得Ca2+浓度下降，炎性细胞因子分泌减少。鉴于此，本研究以钙激活钾通道（Calcium activated-potassium(KCa) channel）作为研究对象，探讨其在石英致肺泡巨噬细胞损伤中的作用。 目的：验证大鼠肺泡巨噬细胞是否表达钙激活钾通道（KCa），并探讨 KCa通道在石英致大鼠肺泡巨噬细胞损伤中的作用。 方法：第一部分：运用全细胞膜片钳技术测定正常培养3h的大鼠肺泡巨噬细胞的KCa通道电流，即时加入BK通道阻断剂Paxilline（1.00μmol/L）、IK通道阻断剂Tram-34（0.25μmol/L）、SK通道阻断剂Apamin（1.00μmol/L）并测定通道的电生理反应，以验证这3种亚型通道。以100μg/ml晶体石英和无定形石英分别染尘，为晶体石英组和无定形石英组。前者共培养3h、6h、12h、24h后，后者共培养3 h、24 h后进行电流记录，从刚破膜（0min）至破膜后20 min每隔2 min依次记录。第二部分：培养大鼠肺泡巨噬细胞（NR8383）作为体外受试系统。阴性对照组未施加任何处理。晶体石英组含100μg/ml晶体石英。无定形石英组含100μg/ml无定形石英。首先比较两种石英各自的作用，然后在100μg/ml晶体石英的基础上添加不同KCa通道阻断剂（BK通道阻断剂Paxilline0.04、0.20、1.00μmol/L，IK通道阻断剂Tram-340.01、0.05、0.25μmol/L和SK通道阻断剂Apamin0.25、0.50、1.00μmol/L），观察通道的作用。测定细胞存活率、乳酸脱氢酶（LDH）活力、白介素-1β（IL-1β）以及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）释放量。 结果：通过全细胞膜片钳模式记录到NR8383细胞膜上存在BK、IK和SK通道电流，在-120~+60 mV范围内BK和IK通道电流呈现外向整流性，而SK通道电流却兼有内向整流性和外向整流性。三者在+60mV达到最大电流密度，分别为(8.7±2.5) pA/pF、(8.3±3.0) pA/pF和(5.2±1.8) pA/pF，平均翻转电位分别为(59.2±5.1) mV、(-65.0±5.5)mV和(-60.3±5.3)mV。通道动力学分析发现，只有BK通道能用Boltzmann方程拟合出稳态激活曲线，半数激活电压V1/2=(9.6±2.8) mV，斜率因子k=22.6±2.5。1μmol/L Paxilline和1μmol/L Apamin能分别将BK和SK通道破膜后最大电流降至刚破膜时电流大小，而0.25μmol/L Tram-34却不能。 与阴性对照组比较，晶体石英和无定形石英均可引起细胞存活率下降、LDH漏出增多、IL-1β和TNF-α释放增加，差异均有统计学意义（P<0.01）。并且，晶体石英致细胞存活率下降和LDH漏出、IL-1β和TNF-α分泌增多较无定形石英更严重，差异均有统计学意义（P<0.01）。与晶体石英组比较，IK通道阻断剂组细胞存活率增高，差异有统计学意义（P<0.01），BK和SK通道阻断剂组细胞存活率与之比较无统计学差异（P>0.05）。BK、IK和SK通道阻断剂组细胞LDH漏出和IL-1β释放都减少，差异有统计学意义（P<0.05）。BK和IK通道阻断剂组TNF-α分泌减少，差异有统计学意义（P<0.05），而SK通道阻断剂对晶体石英致TNF-α释放的影响不明显（P>0.05）。Tram-34降低IL-1β和TNF-α释放量呈剂量—效应关系，其他类型阻断剂则否。 晶体石英共培养各时长组电流比较，以3h组电流增大最为明显。与刚破膜时（0 min）相比，各时长组破膜后电流均增大，20 min内电流未出现明显衰减。3h晶体石英组、3h无定形石英组和正常对照组三者的平均翻转电位分别为(-58.6±1.7)mV、(-61.6±4.9)mV和(-62.4±5.6) mV，差异无统计学意义（P>0.05）。最大外向K+通道电流分别为(13.5±1.6)pA/pF、(5.6±1.4) pA/pF和(7.6±2.9)pA/pF，无定形石英组、正常组与晶体石英组比较电流差异具有统计学意义（P<0.01）。最大外向K+通道电流=刚破膜部分+破膜后增加部分（Ca2+敏感K+通道电流），三组刚破膜部分两两比较电流差异无统计学意义（P>0.05），破膜后增加部分电流差异结果与最大外向K+通道电流一致。 结论：全细胞膜片钳实验证实大鼠肺泡巨噬细胞表达BK、IK和SK通道。阻断大鼠肺泡巨噬细胞KCa通道可降低石英所致细胞膜破坏，减少炎性因子IL-1β和TNF-α的释放。晶体石英作用后细胞外向K+通道电流和Ca2+敏感性K+通道电流明显增大，而无定形石英无此效应。KCa通道可能在石英诱导巨噬细胞损伤中发挥一定作用。