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目的:复制不同碘营养水平的动物模型,研究碘缺乏和碘过量时哺乳期乳腺和甲状腺摄碘能力的变化及相关激素对其的影响。
方法:选择体重80-200克的Wistar大鼠118只(雄性10只,雌性108只),将雌鼠按体重分层后,随机分为6组,每组18只:(1)低碘1组:病区粮食配方低碘饲料,去离子水;(2)低碘2组:病区粮食配方低碘饲料,含碘5μg/L的去离子水;(3)高碘1组:普通粮食配方饲料,含碘3000μg/L的去离子水:(4)高碘2组:普通粮食配方饲料,含碘10000μg/L的去离子水;(5)对照组:普通粮食配方饲料,含碘50μg/L的去离子水;(6)未孕雌鼠对照组:普通粮食配方饲料,含碘50μg/L的去离子水。饲养3个月后,将前5组雌鼠与雄鼠合笼交配,在生育5天和10天时,分别测定母鼠尿碘,然后每组每批处死6只母鼠及其子鼠。称量甲状腺重量,观察光镜下大鼠及子鼠甲状腺病理改变:电镜下垂体和下丘脑的超微结构,用免疫放射方法测定血清甲状腺激素TT3、TT4的含量,采用过硫酸铵消化法测定尿碘的含量,采用温和酸消化法测定血清碘的含量,采用砷铈催化分光光度法测定乳汁碘的含量,采用实时定量PCR法测定甲状腺和乳腺NIS和TSH受体mRNA含量,用免疫放射方法测定血清雌二醇和催乳素的含量。
结果(1)哺乳期大鼠尿碘含量随着碘摄入量的增加而增加,对照组的尿碘中位数低于未孕对照组。(2)低碘组乳汁碘含量低于对照组;高碘组乳汁碘含量高于对照组;低碘1组乳汁碘含量高于低碘2组。(3)哺乳期大鼠血清碘含量随着碘摄入量的增加而增加。(4)低碘组T3水平低于对照组,高碘组T3水平低于对照组,差异均有统计学意义;低碘组T4水平低于对照组,高碘组T4水平高于对照组,差异均有统计学意义,T4水平有随着碘浓度的增加而逐渐升高的趋势。(5)甲状腺和乳腺NIS mRNA表达水平均随着碘摄入量的增加而下降。(6)低碘组和高碘组乳腺TSHR rnRNA表达水平均低于对照组。(7)哺乳期母鼠血清雌二醇含量随着产子时间的延长呈逐渐降低的趋势,雌二醇水平有随着碘水平的增加而减少的趋势。(8)哺乳期大鼠血清催乳素含量随着产子时间的延长呈逐渐降低的趋势,催乳素含量有随着碘水平的增加而减少的趋势。
结论:(1)选用病区配方低碘饲料,饮用去离子水,可以成功复制低碘大鼠动物模型,采用普通粮食配方饲料,饮用不同浓度的含碘去离子水,也可以复制出相应的高碘动物模型。(2)在缺碘情况下,乳腺的摄碘能力增强,存在保护机制;在高碘的条件下,乳腺的摄碘能力降低,也存在保护机制。(3)在缺碘情况下,甲状腺的NIS表达上调,增加碘的摄入量,对母鼠自身和子鼠均产生保护作用;高碘时,甲状腺NIS表达下降,降低碘的摄入,减轻碘过量对母鼠自身和子鼠造成的危害。(4)在甲状腺中,TSH是NIS表达的主要调控因素;而在乳腺中,低碘时TSH不再是主要调控因素,NIS表达受多种激素的控制,高碘时TSH可能是乳腺摄碘能力的主要调节因素。(5)在低碘和高碘条件下,雌二醇都可能和其他激素共同作用,使乳腺的摄碘能力增强;但是雌二醇对甲状腺NIS mRNA表达的调控作用可能比较复杂。(6)催乳素对乳腺的NIS mRNA表达可能有促进作用,能够增强乳腺摄取碘的能力。