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物理和化学刺激均能诱导蜘蛛产生抗菌物质,本文以角类肥蛛为材料,用紫外线照射的方法诱导抗菌物质的产生,并对抗菌物质的稳定性进行研究。在此基础上,还利用单细胞凝胶电泳实验检测在抗菌物质诱导过程中,紫外线对蜘蛛DNA的损伤程度。研究结果如下：
1.角类肥蛛用紫外线分别照射1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、24、36、48小时候,用果蝇和水饲养60h后提取抗菌物质,并检测抗菌活性,发现紫外线照射时间对抗菌物质的产生没有明显的影响。
2.用比浊法研究抗菌物质最大耐热能力,实验表明,经诱导的角类肥蛛抗菌物质混合物具有一定热稳定性,最高耐热温度能力为80℃处理15min,且在此情况下抗菌物质只有微小的活性。
3.抗菌物质在-20℃和室温交替冻融10次后仍有抗菌活性,说明角类肥蛛抗菌物质具有较强的抗冻融能力。
4.抗菌物质在pH3-11之间都具有活性,且在pH4-10之间活性较稳定,而pH<4和pH>10的时候活性明显降低,表明角类肥蛛的抗菌物质具有较强的耐酸碱能力。
5.乙酸铵浓度对抗菌物质的活性具有一定的影响作用,但是影响不具有显著性差异,这表明抗菌物质在0.05-6mol/L的盐浓度下比较稳定。
6.在Hela细胞浓度在106个/mL的2mL培养基加入50μL从蜘蛛体内提取的抗菌物质,培养24h后,细胞培养瓶壁上没有细胞贴壁生长,结果表明,粗提抗菌物质中含有对HeLa细胞杀伤作用的物质,且杀伤作用较强。
7.单细胞凝胶电泳结果表明,1-12h的紫外线照射对角类肥蛛DNA损伤的结果与对照相比具有显著性差异,说明在用紫外线诱导角类肥蛛产生抗菌物质过程中紫外线会引起蜘蛛DNA部分断裂,使其受到一定程度的损伤。