论文部分内容阅读
本文对毕赤酵母发酵生产S-腺苷甲硫氨酸(SAM)进行了工艺优化研究和代谢特性分析，结果如下：
(1)以全合成培养基，在摇瓶实验中，初步探索了菌株的生长特性，确定了菌株发酵最佳生长和生产的基本条件，即初始接种量5﹪(v/v)，生长、生产pH值6.0，PTM1加量8‰(v/v)，0.50mol.L-1的磷酸浓度。
(2)根据其SAM合成酶催化L-Met和ATP反应而合成SAM的代谢特性，重点对其碳氮源的调控进行了研究，取得了很大的突破，使得全合成培养基上SAM的摇瓶生产水平达到1.70g.L-1，是最初SAM摇瓶生产水平0.25g.L-1的近7倍。
(3)在15L全自动发酵罐上，根据毕赤酵母发酵高耗氧的特征，提出了一种新的补料调控策略——溶氧表征调控策略，这为常规的毕赤酵母高密度、高表达外源目的蛋白提供了更为高效、快捷、方便的调控方法。同时，建立了辅以流加硫酸铵和L-蛋氨酸添加的SAM高水平合成发酵策略，SAM合成浓度最大达15g/L，比文献报道提高了近5.0g/L，提高了底物L-Met对SAM的转化率，为工业规模放大提供了强有力的依据。