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【目的】
化学合成及鉴定两种重组神经肽PACAP13和OT23，细胞水平上，设置PACAP13/OT23与细胞一起培养体系，分析和比较PACAP13/OT23对小鼠淋巴细胞的增殖和凋亡的细胞活性作用。在个体水平上，在Pristane诱导的红斑狼疮小鼠和自发性MRL/lpr狼疮小鼠两种系统性红斑狼疮小鼠模型基础上，分析PACAP13/OT23对小鼠自身抗体和肾脏免疫复合物沉积的效应，对胸腺和脾脏初始T细胞生成和输出功能及胸腺功能相关基因表达的影响。
【方法】
1.设计合成重组PACAP13肽和OT23，质谱和色谱分析测定PACAP13/OT23；
2.细胞水平上，设置PACAP13/OT23与细胞一起培养体系，细胞增殖毒性检测试剂CCK8和AnnexinV-FITC/PI流式双染检测PACAP13/OT23对淋巴细胞增殖和凋亡的作用。
3.Pristane诱导的狼疮小鼠模型的建立和鉴定：3~4周龄雌性BALB/c小鼠随机分成对照组、模型组、1nmol/ml和10nmol/ml浓度PACAP13干预组、1nmol/ml和10nmol/ml浓度OT23干预组。模型组、各浓度的PACAP13干预组和OT23干预组单次腹腔注射降植烷注射液0.5ml，对照组单次腹腔注射等量的生理盐水。各浓度的PACAP13干预组和OT23干预组一周后分别腹腔注射1nmol/ml和10nmol/ml浓度溶液，一周一次连续注射12次。3个月建模完成，采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)分别测定各组血清抗ANA抗体、抗dsDNA抗体、抗RNP/sm抗体水平。
4.PACAP13和OT23在两种小鼠模型中对小鼠自身抗体和肾脏免疫复合物沉积的效应：Pristane诱导的狼疮小鼠模型随机分成模型组、PACAP13组和OT23组；6~8周龄自发性雌性MRL/lpr小鼠，随机分成MRL/lpr组、PACAP13组和OT23组。PACAP13组和OT23组分别每天腹腔注射10nmol/mlPACAP13和10nmol/mlOT23溶液，对照组注射等量生理盐水，连续注射14天。
采用ELISA法分别测定各组血清抗ANA抗体、抗dsDNA抗体、抗RNP/sm抗体及IgG抗体水平；肾脏冰冻切片进行IgG蛋白沉积免疫荧光检查；
5.实时定量PCR检测胸腺和脾脏初始T淋巴细胞标志物(sjTREC)的含量评价：PACAP13和OT23在两种小鼠模型中对小鼠初始T细胞输出水平的作用。
6.逆转录实时定量PCR检测胸腺相关基因CXCL13、Foxp3、TGF-β、Aire、Fezf2、RORγt、IL-17的表达，分析PACAP13和OT23对两种小鼠模型中胸腺功能相关基因表达的影响。
【结果】
1.通过质谱和色谱分析测定后确定合成产物为目标多肽，电喷雾离子源(ESI)正离子模式进行质谱检测，PACAP13分子量为1547.59Da，OT23分子量为2899.21Da，与理论值相符。不同浓度的PACAP13和OT23对小鼠胸腺淋巴细胞都具有增殖作用，1nmol/ml和10nmol/ml浓度对淋巴细胞增殖作用，与对照组比较，差异具有统计学意义(P＜0.01)。10nmol/ml浓度的OT23对淋巴细胞的增值作用较10nmol/ml浓度的PACAP13更显著，差异具有统计学意义(P＜0.05)。不同浓度的PACAP13和OT23对小鼠胸腺淋巴细胞都具有保护作用，可以抑制淋巴细胞的凋亡，1nmol/ml和10nmol/ml浓度对淋巴细胞作用，与加Dex对照组比较，差异具有统计学意义(P＜0.01)。
2.建立Pristane诱导红斑狼疮小鼠模型，3个月后均无小鼠死亡。对照组小鼠普通饮食、饮水，大小便正常，活泼健壮，体毛有光泽。狼疮模型组小鼠体毛松散，特别是小鼠口鼻处体毛脱落，活动减少，体重增长较对照组快，出现明显的狼疮体征。分离Pristane诱导狼疮小鼠脾脏及胸腺组织，与对照组相比，狼疮模型小鼠存在脾脏和胸腺肿大症状，以及胸腺及脾脏重量均高于对照组。取小鼠肾脏冰冻切片，采用羊抗小鼠IgG-FITC抗体直接免疫荧光染色后，狼疮模型组小鼠肾脏可见沿毛细血管壁的弥漫性绿色荧光，IgG颗粒状沉积，对照组小鼠肾脏荧光微弱。
3.Pristane诱导红斑狼疮模型小鼠，模型组小鼠血清ANA抗体(7124.66±1072.95)、抗dsDNA抗体(2595.46±510.24)、抗RNP/sm抗体(1887.65±404.67)与对照组相比水平显著升高，差异具有统计学意义(P＜0.01)，对照组小鼠的血清ANA抗体(3609.89±910.96)、抗dsDNA抗体(1427.39±174.90)、抗RNP/sm抗体(1212.88±204.83)水平。Pristane成功诱导BALB/c小鼠系统性红斑狼疮模型，且小鼠出现自身抗体异常增多症状。与模型组相比，1nmol/mlPACAP13干预组小鼠血清ANA抗体(4964.55±373.08)水平显著降低(P＜0.01)，10nmol/mlPACAP13干预组小鼠血清ANA抗体(4064.91±985.99)、抗RNP/sm抗体(1180.72±268.45)水平显著下降(P＜0.01)，抗dsDNA抗体(2069.60±237.91)水平明显降低(P＜0.05)，差异具有统计学意义，且10nmol/mlPACAP13干预组较1nmol/mlPACAP13干预组，小鼠血清抗dsDNA抗体、抗RNP/sm抗体水平减少更显著(P＜0.05)，差异具有统计学意义。与模型组相比，1nmol/mlOT23干预组小鼠血清抗dsDNA抗体(1771.32±130.94)、抗RNP/sm抗体(1349.26±222.11)水平显著降低(P＜0.01)，10nmol/mlOT23干预组小鼠血清ANA抗体(3316.23±430.18)、抗dsDNA抗体(1524.95±403.92)水平显著下降(P＜0.01)，差异具有统计学意义，且10nmol/mlOT23干预组小鼠血清抗ANA抗体水平较1nmol/mlOT23干预组ANA抗体水平减少更显著(P＜0.01)。
4.采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)分别测定PACAP13组和OT23组与狼疮模型组小鼠血清ANA抗体、抗dsDNA抗体、抗RNP/sm抗体及IgG抗体水平。Pristane诱导狼疮模型中，PACAP13组小鼠血清ANA抗体(4944.37±991.13)、抗dsDNA抗体(1958.83±314.03)、抗RNP/sm抗体(1519.73±397.67)水平与模型组小鼠相比减少，差异具有统计学意义(P＜0.05)。而PACAP13组小鼠血清总IGg抗体与模型组小鼠血清总IGg抗体相比，差异无统计学意义。OT23组小鼠血清ANA抗体(4373.57±658.15)、抗dsDNA抗体(1708.16±466.84)、抗RNP/sm抗体(1374.19±417.76)水平与模型组相比显著降低，差异具有统计学意义(P＜0.01)，OT23组小鼠血清总IGg抗体(63.72±17.52)与模型组相比减少，差异具有统计学意义(P＜0.05)。模型组小鼠的血清ANA抗体(7801.51±1001.91)、抗dsDNA抗体(2622.34±525.51)、抗RNP/sm抗体(2244.30±631.38)、IGg抗体(84.64±12.75)水平。取小鼠肾脏冰冻切片，采用羊抗小鼠IgG-FITC抗体直接免疫荧光染色后，PACAP13组和OT23组与Pristane诱导狼疮模型组小鼠相比，肾脏组织沿毛细血管壁的弥漫性绿色荧光相对减弱，IgG颗粒状沉积减少。
MRL/lpr自发性狼疮模型中，PACAP13组小鼠血清ANA抗体(4294.35±735.23)、抗dsDNA抗体(1359.95±317.25)、抗RNP/sm抗体(1124.90±160.88)水平与模型组小鼠相比明显减少，差异具有统计学意义(P＜0.01)，OT23组小鼠血清ANA抗体(3597.01±525.22)、抗dsDNA抗体(1203.70±282.36)、抗RNP/sm抗体(1078.28±346.26)水平与MRL/lpr模型组小鼠相比显著降低，差异具有统计学意义(P＜0.01)。而PACAP13组和OT23组小鼠血清总IGg抗体与模型组相比，差异均无统计学意义。MRL/lpr模型组小鼠血清ANA抗体(6296.86±927.05)、抗dsDNA抗体(2812.02±666.26)、抗RNP/sm抗体(1693.49±267.05)、IGg抗体(91.28±6.65)水平。取小鼠肾脏冰冻切片，采用羊抗小鼠IgG-FITC抗体直接免疫荧光染色后，PACAP13组和OT23组与MRL/lpr模型组小鼠相比，肾脏组织沿毛细血管壁的弥漫性绿色荧光相对减弱，IgG沿毛细血管壁颗粒状沉积减少。
5.实时定量PCR检测胸腺和脾脏初始T淋巴细胞标志物(sjTREC)的含量，Pristane诱导的狼疮小鼠模型中，PACAP13组胸腺和脾脏淋巴细胞sjTREC的含量分别为1820290.74±64731.96和1857441.00±48262.02，OT23组胸腺和脾脏淋巴细胞sjTREC的含量分别为2032378.84±113129.68和2116611.45±44967.71，模型组胸腺和脾脏淋巴细胞sjTREC的含量分别为1350826.23±100789.25和1690741.503±90196.15。PACAP组胸腺淋巴细胞和OT23组胸腺、脾脏淋巴细胞中sjTREC含量与模型组比较，差异均具有统计学意义(P＜0.01)，PACAP13组脾脏淋巴细胞中sjTREC含量与模型组比较，差异具有统计学意义(P＜0.05)。PACAP13组和OT23组比较，OT23对胸腺和脾脏中sjTREC含量升高更显著，差异具有统计学意义(P＜0.01)。
自发性MRL/lpr小鼠模型中，PACAP13组胸腺和脾脏淋巴细胞sjTREC的含量分别为1834598.42±111229.44和1743088.14±81789.91，OT23组胸腺和脾脏淋巴细胞sjTREC的含量分别为1924995.60±129687.97和1979199.37±78955.95，模型组胸腺和脾脏淋巴细胞sjTREC的含量分别为1434036.37±90730.29和1563433.14±101878.68。PACAP13组胸腺淋巴细胞和OT23组胸腺、脾脏淋巴细胞中sjTREC含量与模型组比较，差异均具有统计学意义(P＜0.01)，PACAP13组脾脏淋巴细胞中sjTREC含量与模型组比较，差异具有统计学意义(P＜0.05)。OT23组脾脏中sjTREC含量与PACAP13组相比更高，差异具有统计学意义(P＜0.05)。
6.逆转录实时定量PCR检测胸腺相关基因的表达。Pristane诱导的狼疮小鼠模型中，与模型组比较，PACAP13组胸腺CXCL13基因(0.69±0.13)表达下调，Aire(2.70±0.40)、Fezf2(1.68±0.30)、Foxp3(1.55±0.23)、TGF-β(1.86±0.48)表达均上调，差异均具有统计学意义(P＜0.01)；与模型组比较，OT23组胸腺CXCL13基因(0.73±0.13)表达下调，Aire(2.96±0.44)、Fezf2(2.53±0.46)、Foxp3(1.61±0.24)、TGF-β(1.90±0.49)表达均上调，差异均具有统计学意义(P＜0.01)。OT23组较PACAP13组，Fezf2表达差异更显著(P＜0.01)。MRL/lpr小鼠模型，PACAP13组与模型组比较，胸腺CXCL13(0.83±0.16)、RORγt(0.74±0.08)、IL-17(0.81±0.16)基因表达下调，差异具有统计学意义(P＜0.05)。OT23组与模型组比较，胸腺CXCL13(0.71±0.17)、RORγt(0.69±0.07)、IL-17(0.70±0.14)基因表达下调，差异具有统计学意义(P＜0.01)。
【结论】
1.PACAP13和OT23对小鼠淋巴细胞具有促进增殖抑制凋亡的作用。
2.PACAP13和OT23能降低狼疮小鼠血清ANA抗体、抗dsDNA抗体、抗RNP/sm抗体等自身抗体水平，减轻脾脏和胸腺肿大调节免疫器官异常，减少免疫复合物沉积。
3.PACAP13和OT23能增强胸腺的输出功能，提高初始T细胞的生成和输出能力，维持外周T细胞受体库的多样性，且OT23对初始T细胞生成和输出效果更好。
4.PACAP13和OT23能通过增加胸腺TGF-β及其转录因子Foxp3减轻诱导性狼疮小鼠的炎症反应；抑制B细胞聚集，减少自身抗体生成与炎症细胞迁移；增强清除自身免疫性T细胞能力从而建立自我耐受，改善胸腺功能。
5.PACAP13和OT23可以通过抑制胸腺IL-17及其转录因子RORγt减轻自发性MRL/lpr小鼠炎症反应；抑制B细胞迁移聚集，减少自身抗体生成与炎症细胞迁移，改善胸腺功能。
化学合成及鉴定两种重组神经肽PACAP13和OT23，细胞水平上，设置PACAP13/OT23与细胞一起培养体系，分析和比较PACAP13/OT23对小鼠淋巴细胞的增殖和凋亡的细胞活性作用。在个体水平上，在Pristane诱导的红斑狼疮小鼠和自发性MRL/lpr狼疮小鼠两种系统性红斑狼疮小鼠模型基础上，分析PACAP13/OT23对小鼠自身抗体和肾脏免疫复合物沉积的效应，对胸腺和脾脏初始T细胞生成和输出功能及胸腺功能相关基因表达的影响。
【方法】
1.设计合成重组PACAP13肽和OT23，质谱和色谱分析测定PACAP13/OT23；
2.细胞水平上，设置PACAP13/OT23与细胞一起培养体系，细胞增殖毒性检测试剂CCK8和AnnexinV-FITC/PI流式双染检测PACAP13/OT23对淋巴细胞增殖和凋亡的作用。
3.Pristane诱导的狼疮小鼠模型的建立和鉴定：3~4周龄雌性BALB/c小鼠随机分成对照组、模型组、1nmol/ml和10nmol/ml浓度PACAP13干预组、1nmol/ml和10nmol/ml浓度OT23干预组。模型组、各浓度的PACAP13干预组和OT23干预组单次腹腔注射降植烷注射液0.5ml，对照组单次腹腔注射等量的生理盐水。各浓度的PACAP13干预组和OT23干预组一周后分别腹腔注射1nmol/ml和10nmol/ml浓度溶液，一周一次连续注射12次。3个月建模完成，采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)分别测定各组血清抗ANA抗体、抗dsDNA抗体、抗RNP/sm抗体水平。
4.PACAP13和OT23在两种小鼠模型中对小鼠自身抗体和肾脏免疫复合物沉积的效应：Pristane诱导的狼疮小鼠模型随机分成模型组、PACAP13组和OT23组；6~8周龄自发性雌性MRL/lpr小鼠，随机分成MRL/lpr组、PACAP13组和OT23组。PACAP13组和OT23组分别每天腹腔注射10nmol/mlPACAP13和10nmol/mlOT23溶液，对照组注射等量生理盐水，连续注射14天。
采用ELISA法分别测定各组血清抗ANA抗体、抗dsDNA抗体、抗RNP/sm抗体及IgG抗体水平；肾脏冰冻切片进行IgG蛋白沉积免疫荧光检查；
5.实时定量PCR检测胸腺和脾脏初始T淋巴细胞标志物(sjTREC)的含量评价：PACAP13和OT23在两种小鼠模型中对小鼠初始T细胞输出水平的作用。
6.逆转录实时定量PCR检测胸腺相关基因CXCL13、Foxp3、TGF-β、Aire、Fezf2、RORγt、IL-17的表达，分析PACAP13和OT23对两种小鼠模型中胸腺功能相关基因表达的影响。
【结果】
1.通过质谱和色谱分析测定后确定合成产物为目标多肽，电喷雾离子源(ESI)正离子模式进行质谱检测，PACAP13分子量为1547.59Da，OT23分子量为2899.21Da，与理论值相符。不同浓度的PACAP13和OT23对小鼠胸腺淋巴细胞都具有增殖作用，1nmol/ml和10nmol/ml浓度对淋巴细胞增殖作用，与对照组比较，差异具有统计学意义(P＜0.01)。10nmol/ml浓度的OT23对淋巴细胞的增值作用较10nmol/ml浓度的PACAP13更显著，差异具有统计学意义(P＜0.05)。不同浓度的PACAP13和OT23对小鼠胸腺淋巴细胞都具有保护作用，可以抑制淋巴细胞的凋亡，1nmol/ml和10nmol/ml浓度对淋巴细胞作用，与加Dex对照组比较，差异具有统计学意义(P＜0.01)。
2.建立Pristane诱导红斑狼疮小鼠模型，3个月后均无小鼠死亡。对照组小鼠普通饮食、饮水，大小便正常，活泼健壮，体毛有光泽。狼疮模型组小鼠体毛松散，特别是小鼠口鼻处体毛脱落，活动减少，体重增长较对照组快，出现明显的狼疮体征。分离Pristane诱导狼疮小鼠脾脏及胸腺组织，与对照组相比，狼疮模型小鼠存在脾脏和胸腺肿大症状，以及胸腺及脾脏重量均高于对照组。取小鼠肾脏冰冻切片，采用羊抗小鼠IgG-FITC抗体直接免疫荧光染色后，狼疮模型组小鼠肾脏可见沿毛细血管壁的弥漫性绿色荧光，IgG颗粒状沉积，对照组小鼠肾脏荧光微弱。
3.Pristane诱导红斑狼疮模型小鼠，模型组小鼠血清ANA抗体(7124.66±1072.95)、抗dsDNA抗体(2595.46±510.24)、抗RNP/sm抗体(1887.65±404.67)与对照组相比水平显著升高，差异具有统计学意义(P＜0.01)，对照组小鼠的血清ANA抗体(3609.89±910.96)、抗dsDNA抗体(1427.39±174.90)、抗RNP/sm抗体(1212.88±204.83)水平。Pristane成功诱导BALB/c小鼠系统性红斑狼疮模型，且小鼠出现自身抗体异常增多症状。与模型组相比，1nmol/mlPACAP13干预组小鼠血清ANA抗体(4964.55±373.08)水平显著降低(P＜0.01)，10nmol/mlPACAP13干预组小鼠血清ANA抗体(4064.91±985.99)、抗RNP/sm抗体(1180.72±268.45)水平显著下降(P＜0.01)，抗dsDNA抗体(2069.60±237.91)水平明显降低(P＜0.05)，差异具有统计学意义，且10nmol/mlPACAP13干预组较1nmol/mlPACAP13干预组，小鼠血清抗dsDNA抗体、抗RNP/sm抗体水平减少更显著(P＜0.05)，差异具有统计学意义。与模型组相比，1nmol/mlOT23干预组小鼠血清抗dsDNA抗体(1771.32±130.94)、抗RNP/sm抗体(1349.26±222.11)水平显著降低(P＜0.01)，10nmol/mlOT23干预组小鼠血清ANA抗体(3316.23±430.18)、抗dsDNA抗体(1524.95±403.92)水平显著下降(P＜0.01)，差异具有统计学意义，且10nmol/mlOT23干预组小鼠血清抗ANA抗体水平较1nmol/mlOT23干预组ANA抗体水平减少更显著(P＜0.01)。
4.采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)分别测定PACAP13组和OT23组与狼疮模型组小鼠血清ANA抗体、抗dsDNA抗体、抗RNP/sm抗体及IgG抗体水平。Pristane诱导狼疮模型中，PACAP13组小鼠血清ANA抗体(4944.37±991.13)、抗dsDNA抗体(1958.83±314.03)、抗RNP/sm抗体(1519.73±397.67)水平与模型组小鼠相比减少，差异具有统计学意义(P＜0.05)。而PACAP13组小鼠血清总IGg抗体与模型组小鼠血清总IGg抗体相比，差异无统计学意义。OT23组小鼠血清ANA抗体(4373.57±658.15)、抗dsDNA抗体(1708.16±466.84)、抗RNP/sm抗体(1374.19±417.76)水平与模型组相比显著降低，差异具有统计学意义(P＜0.01)，OT23组小鼠血清总IGg抗体(63.72±17.52)与模型组相比减少，差异具有统计学意义(P＜0.05)。模型组小鼠的血清ANA抗体(7801.51±1001.91)、抗dsDNA抗体(2622.34±525.51)、抗RNP/sm抗体(2244.30±631.38)、IGg抗体(84.64±12.75)水平。取小鼠肾脏冰冻切片，采用羊抗小鼠IgG-FITC抗体直接免疫荧光染色后，PACAP13组和OT23组与Pristane诱导狼疮模型组小鼠相比，肾脏组织沿毛细血管壁的弥漫性绿色荧光相对减弱，IgG颗粒状沉积减少。
MRL/lpr自发性狼疮模型中，PACAP13组小鼠血清ANA抗体(4294.35±735.23)、抗dsDNA抗体(1359.95±317.25)、抗RNP/sm抗体(1124.90±160.88)水平与模型组小鼠相比明显减少，差异具有统计学意义(P＜0.01)，OT23组小鼠血清ANA抗体(3597.01±525.22)、抗dsDNA抗体(1203.70±282.36)、抗RNP/sm抗体(1078.28±346.26)水平与MRL/lpr模型组小鼠相比显著降低，差异具有统计学意义(P＜0.01)。而PACAP13组和OT23组小鼠血清总IGg抗体与模型组相比，差异均无统计学意义。MRL/lpr模型组小鼠血清ANA抗体(6296.86±927.05)、抗dsDNA抗体(2812.02±666.26)、抗RNP/sm抗体(1693.49±267.05)、IGg抗体(91.28±6.65)水平。取小鼠肾脏冰冻切片，采用羊抗小鼠IgG-FITC抗体直接免疫荧光染色后，PACAP13组和OT23组与MRL/lpr模型组小鼠相比，肾脏组织沿毛细血管壁的弥漫性绿色荧光相对减弱，IgG沿毛细血管壁颗粒状沉积减少。
5.实时定量PCR检测胸腺和脾脏初始T淋巴细胞标志物(sjTREC)的含量，Pristane诱导的狼疮小鼠模型中，PACAP13组胸腺和脾脏淋巴细胞sjTREC的含量分别为1820290.74±64731.96和1857441.00±48262.02，OT23组胸腺和脾脏淋巴细胞sjTREC的含量分别为2032378.84±113129.68和2116611.45±44967.71，模型组胸腺和脾脏淋巴细胞sjTREC的含量分别为1350826.23±100789.25和1690741.503±90196.15。PACAP组胸腺淋巴细胞和OT23组胸腺、脾脏淋巴细胞中sjTREC含量与模型组比较，差异均具有统计学意义(P＜0.01)，PACAP13组脾脏淋巴细胞中sjTREC含量与模型组比较，差异具有统计学意义(P＜0.05)。PACAP13组和OT23组比较，OT23对胸腺和脾脏中sjTREC含量升高更显著，差异具有统计学意义(P＜0.01)。
自发性MRL/lpr小鼠模型中，PACAP13组胸腺和脾脏淋巴细胞sjTREC的含量分别为1834598.42±111229.44和1743088.14±81789.91，OT23组胸腺和脾脏淋巴细胞sjTREC的含量分别为1924995.60±129687.97和1979199.37±78955.95，模型组胸腺和脾脏淋巴细胞sjTREC的含量分别为1434036.37±90730.29和1563433.14±101878.68。PACAP13组胸腺淋巴细胞和OT23组胸腺、脾脏淋巴细胞中sjTREC含量与模型组比较，差异均具有统计学意义(P＜0.01)，PACAP13组脾脏淋巴细胞中sjTREC含量与模型组比较，差异具有统计学意义(P＜0.05)。OT23组脾脏中sjTREC含量与PACAP13组相比更高，差异具有统计学意义(P＜0.05)。
6.逆转录实时定量PCR检测胸腺相关基因的表达。Pristane诱导的狼疮小鼠模型中，与模型组比较，PACAP13组胸腺CXCL13基因(0.69±0.13)表达下调，Aire(2.70±0.40)、Fezf2(1.68±0.30)、Foxp3(1.55±0.23)、TGF-β(1.86±0.48)表达均上调，差异均具有统计学意义(P＜0.01)；与模型组比较，OT23组胸腺CXCL13基因(0.73±0.13)表达下调，Aire(2.96±0.44)、Fezf2(2.53±0.46)、Foxp3(1.61±0.24)、TGF-β(1.90±0.49)表达均上调，差异均具有统计学意义(P＜0.01)。OT23组较PACAP13组，Fezf2表达差异更显著(P＜0.01)。MRL/lpr小鼠模型，PACAP13组与模型组比较，胸腺CXCL13(0.83±0.16)、RORγt(0.74±0.08)、IL-17(0.81±0.16)基因表达下调，差异具有统计学意义(P＜0.05)。OT23组与模型组比较，胸腺CXCL13(0.71±0.17)、RORγt(0.69±0.07)、IL-17(0.70±0.14)基因表达下调，差异具有统计学意义(P＜0.01)。
【结论】
1.PACAP13和OT23对小鼠淋巴细胞具有促进增殖抑制凋亡的作用。
2.PACAP13和OT23能降低狼疮小鼠血清ANA抗体、抗dsDNA抗体、抗RNP/sm抗体等自身抗体水平，减轻脾脏和胸腺肿大调节免疫器官异常，减少免疫复合物沉积。
3.PACAP13和OT23能增强胸腺的输出功能，提高初始T细胞的生成和输出能力，维持外周T细胞受体库的多样性，且OT23对初始T细胞生成和输出效果更好。
4.PACAP13和OT23能通过增加胸腺TGF-β及其转录因子Foxp3减轻诱导性狼疮小鼠的炎症反应；抑制B细胞聚集，减少自身抗体生成与炎症细胞迁移；增强清除自身免疫性T细胞能力从而建立自我耐受，改善胸腺功能。
5.PACAP13和OT23可以通过抑制胸腺IL-17及其转录因子RORγt减轻自发性MRL/lpr小鼠炎症反应；抑制B细胞迁移聚集，减少自身抗体生成与炎症细胞迁移，改善胸腺功能。