细胞自噬是真核生物中保守的降解途径。细胞自噬通过形成双层膜的结构，包裹细胞质成分，形成自噬体，随后自噬体与液泡或溶酶体融合，降解内含物。细胞自噬在清除胞内蛋白质和细胞器，生长发育，抗衰老，病原体清除，抗原呈现中起到重要作用。　　到目前为止，酵母中已经发现38个与自噬相关的Atg蛋白，其中18个是核心蛋白。18个核心蛋白被分为六个功能组。Atg9小泡就是其中的一个功能组。Atg9存在于直径30-60nm的单层膜小泡上，被称为Atg9小泡。Atg9是一个高度保守的整合膜蛋白，其N端和C端都位于胞质中，中间是一个6次跨膜的结构。和大多数定位于PAS的其他Atg蛋白相比，Atg9除了定位于PAS，也定位于线粒体和一些特殊的外周膜结构。Atg9在PAS和外周膜结构之间循环，被认为是自噬体膜的载体。因此，研究Atg9在细胞中的定位，对研究自噬的基本过程有重要的意义。GFP标记Atg9是研究细胞中Atg9定位的重要方法。酵母细胞中，Atg9-GFP形成多个点，其中有一个点定位PAS，其余各点都分布在外周膜结构上。但是由于Atg9表达量相对较低，导致GFP标记的Atg9荧光信号较弱，这不利于Atg9的延时拍摄。　　本文通过串联多个GFP分别标记Atg9C端和N端，得到GFP标记Atg9的质粒，随后质粒转化酵母菌，得到表达GFP标记Atg9的融合蛋白，通过自噬水平检测，蛋白免疫印迹检测，荧光显微镜观测，筛选出适合拍摄或延时拍摄的Atg9的质粒。这对后续的细胞自噬的研究奠定重要的基础。