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利用RT-PCR方法从拟南芥cDNA中克隆出AtFH8的全序列.从该序列推断出的氨基酸序列与TAIR中的信息完全一致.该蛋白质含有760个aa残基,分子量为83.6 kDa,pI为9.54.与其它formin蛋白质的多序列比对表明该序列含有保守的FH2结构域和FH1结构域,因此属于formin家族蛋白质.为研究AtFH8蛋白质FH1和FH2结构域的功能,我们构建了AtFH8(FH1FH2)和AtFH8(FH2)两个缺失突变体,利用pET系统表达了组氨酸(His)标签蛋白质,进一步利用Ni+-NTA agarose层析和CM(羧甲基)阳离子交换层析得到了纯化的重组蛋白质.利用纯化的蛋白质,我们发现AtFH8(FH1FH2)可以在体外使肌动蛋白成核,并且这种成核具有肌动蛋白单体和formin浓度的依赖性.我们的研究还显示AtFH8(FH1FH2)可以将肌动蛋白丝的正端封端,从而部分抑制该末端的解聚和聚合速度.另外,纯化的AtFH8(FH1FH2)可以与肌动蛋白丝结合并将其剪切为小的片断.Profilin(前纤维蛋白)是一种小分子量的肌动蛋白单体结合蛋白,它抑制成核并抑制肌动蛋白丝负端的聚合.研究显示其它生物的formin可以促进profilin-actin的成核.我们的亲合沉淀测定结果证实了AtFH8的FH1结构域介导AtFH8与profilin的相互作用.在AtFH8(FH1FH2)存在情况下,profilin抑制AtFH8(FH1FH2)的成核,然而却促进肌动蛋白丝正端的延长.而profilin对AtFH8(FH2)引起的成核作用没有影响,说明在肌动蛋白单体为proflin所结合时,FH1结构域对AtFH8蛋白质的成核至关重要.以上结果暗示profilin可能作为促进AtFH8(FH1FH2)成核的肌动蛋白丝正端聚合的调节因子.我们利用免疫印迹的方法检测了AtFH8在拟南芥中的存在及亚细胞定位.结果表明,AtFH8在拟南芥植株中含量甚少.但是,利用免疫沉淀富集后,在AtFH8特定分子量处有较强的阳性信号.而利用膜组分的免疫印迹发现清晰的AtFH8条带.这些结果显示AtFH8蛋白质在拟南芥植株中表达,并且它可能定位于细胞的膜系统.