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本研究根据GenBank上登录的美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中国分离株(PRRSV CH—1a strain)的基因序列，设计了1对特异性引物，采用建立的RT-PCR方法对采集于广东肇庆某猪场疑似高致病性猪繁殖与呼吸综合症病死猪的病料进行了检测，检测结果为PRRSV阳性。将阳性病料处理后，接种Marc—145细胞进行病毒分离，经过三代盲传，出现了典型的细胞病变(CPE)，分离到一株PRRSV，命名为PRRSV GD—ZQ株。对该分离毒株的TCID50的测定结果为10-5.6/0.1mL。
参考GenBank上登录的美洲型PRRSV VR2332和CH—1a株基因序列，设计了3对引物，对PRRSV GD—ZQ株的Nsp2部分序列、ORF3、ORF5进行了RT-PCR扩增。对扩增出的基因片段进行克隆和序列测定，应用DNASTAR生物信息学软件对测序结果进行相似性和遗传进化分析，结果显示GD—ZQ株与美洲型VR—2332、 CH—1a等毒株相应基因的苷酸序列相似性在86.3％～99.4％之间，而于与欧洲毒株LV的相似性仅为48.2％～48.5％，遗传进化分析显示GD—ZQ株与CH—1a处株于同一分支，从而表明GD—ZQ株属于美洲型毒株；与近几年国内分到的高致病性PRRSV变异株一致的是，GD—ZQ株的Nsp2有编码1个氨基酸的3个碱基缺失和编码29个氨基酸的连续87个碱基缺失。
针对PRRSV变异株与经典毒株的序列差异，应用Primer Express3.0软件设计一对特异性鉴别引物和一条TaqMan探针，对反应条件进行优化，建立了可鉴别诊断PRRSV变异株与经典毒株的TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR技术。研究结果表明本方法可鉴别诊断PRRSV变异株和经典株，对其他猪口蹄疫病毒(FMDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、副猪嗜血杆菌(HPS)等常见猪源病原无扩增曲线，有较高的特异性；与常规RT-PCR方法进行敏感性比较，本方法可以检测相当于1TCID50的病毒模板，比常规RT-PCR方法灵敏度高100倍；对标准模板进行扩增建立了标准曲线和回归方程，确定了循环阈值(Ct)和病毒TCID50对数之间的线性关系，可以对病毒含量进行绝对定量。
用纯化的PRRSVGD—ZQ株作为免疫原，腹腔注射免疫6周龄雌性BALB/c小鼠，三免后第2周检测小鼠抗体水平，对抗体水平较高的小鼠加强免疫后第三天取脾细胞与Sp2/0细胞融合，利用建立的间接ELISA技术对杂交瘤细胞进行筛选，共获得两株能稳定分泌抗猪繁殖与呼吸综合症病毒变异株单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株，分别命名为5D5、7G4，单抗亚类鉴定结果均为IgG1；其纯化腹水的间接ELISA效价分别为1：2000、1:16000。特异性实验结果表明两株单抗仅与PRRSVGD—ZQ株发生特异性反应，而与猪口蹄疫病毒(FMDV)、猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等常见猪源病毒均无交叉反应。Western blot实验结果表明两株单抗均为针对PRRSVGD—ZQ株N蛋白的抗体。