亚硒酸钠对蛹虫草主要活性物质含量的影响

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本文主要基于在蛹虫草菌种人工培养过程中在固体培养基中添加亚硒酸钠营养液获得富硒蛹虫草,然后以子实体及固体培养残基为材料,探索固体培养基中亚硒酸钠的浓度对蛹虫草中腺苷、虫草素、甘露醇、SOD酶活力、总硒及有机硒含量的影响。主要结果如下:⑴建立了一种以甲醇:水=10:90为流动相,超纯水为提取液,经色谱柱XBridgeTMC18(5μm,4.6×150mm)分离,流速为1.0mL/min,柱温30℃,进样量为10μL,紫外检测波长选取254nm等条件的高效液相色谱一次进样同时测定蛹虫草子实体及固体培养基中腺苷和虫草素的方法,其子实体中腺苷和虫草素的加标回收率分别为93.67%、90.57%;固体培养基中腺苷和虫草素的加标回收率分别为92.18%、91.62%。将本方法与农业行业标准方法、企业标准方法作对比试验发现,本法检出限高、重复性好、回收率高。  ⑵采用氢化原子荧光光谱法对富硒蛹虫草中总硒含量进行测定,经单因素实验及正交实验对样品中无机硒的萃取条件进行优化,选择超声时间为20min、离心转速为6000r/min、离心时间为15min、萃取过程中采用环己烷萃取2次、萃取时间2h为最优萃取条件,本方法测得的无机硒的空白、加标回收率分别为93.59%与88.10%,RSD分别为1.41%,1.22%;  ⑶固体培养基中亚硒酸钠浓度的变化对蛹虫草子实体及其固体培养基中腺苷与虫草素含量、SOD酶活力、虫草酸含量、总硒及无机硒含量均有明显影响。  固体培养基中低浓度的亚硒酸钠对虫草子实体中腺苷与虫草素的影响不明显,较高浓度的亚硒酸钠则使二者含量出现明显波动现象;蛹虫草子实体中的腺苷含量高于其固体培养基,但子实体中虫草素的含量较低;固体培养基中的腺苷含量极少,不随亚硒酸钠的添加浓度变化而变化,但引起虫草素含量的发生明显改变。  培养基中亚硒酸钠的浓度与富硒蛹虫草中总硒与有机硒的含量呈正相关性,此性质可作为控制蛹虫草中硒含量的手段。富硒虫草中的总硒与有机硒含量皆远高于普通蛹虫草,蛹虫草能将绝大部分外源无机硒通过体内代谢转化为有机硒,且子实体中的总硒与有机硒含量均远远高于其固体培养基,是一种优良的富硒载体。
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