【摘 要】
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睾丸金属结合蛋白是重金属毒理学家在研究重金属离子如Cd等对睾丸组织的毒害作用时发现的一类与金属离子具有结合能力的蛋白质.得到三个层析峰.第一峰通过金属螯合层析,DEAE-
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睾丸金属结合蛋白是重金属毒理学家在研究重金属离子如Cd<2+>等对睾丸组织的毒害作用时发现的一类与金属离子具有结合能力的蛋白质.得到三个层析峰.第一峰通过金属螯合层析,DEAE-Sepharose4BF.F.阴离子交换层析分离纯化,最终得到两个组分,这两个组分经SDS-PAGE不连续电泳分析鉴定,它们的分子量分别为66kD和80kD左右.第二峰通过金属螯合层析和反相HPLC分离纯化,得到一个组分,经SDS-PAGE不连续电泳分析鉴定,其分子量为40kD左右.此外,另将离心后的上清液先用镉离子饱和后,再过SephadexG-50柱层析分离,第二峰经DEAE-Sephadex4BF.F.阴离子交换层析分离,所得组分经SDS-PAGE不连续电泳检测,表明其分子量为3000Da左右.质谱测定其分子量为5683Da.通过紫外吸收光谱扫描分析,金属结合蛋白的吸收波长在275nm-300nm之间与MT的吸收曲线有所不同.氨基酸组成分析表明该蛋白含有芳香族氨基酸和较低的Cys含量.综合上述结果可以初步证实金属结合蛋白的性质与金属硫蛋白有区别,小分子量的睾丸金属结合蛋白不是金属硫蛋白.
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