【摘 要】
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该研究采用重复漂洗/离心法分离纯化了杜仲橡胶颗粒,SDS-PAGE分析发现杜仲橡胶颗粒含有十几种蛋白,其中以56ku、30ku两种蛋白的丰度较高.从中我们分离和纯化了丰度较高的56ku
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该研究采用重复漂洗/离心法分离纯化了杜仲橡胶颗粒,SDS-PAGE分析发现杜仲橡胶颗粒含有十几种蛋白,其中以56ku、30ku两种蛋白的丰度较高.从中我们分离和纯化了丰度较高的56ku、30ku两种蛋白,称之为EuRPP<,56Ku>和EuRPP<,30Ku>,并测得两种蛋白的等电点分别为3.93和3.78.肉桂醇脱氢酶(CAD)是催化木质素前体合成的最后一步的酶,催化由对香豆醛向对香豆醇转变的反应,在木质素代谢中所处的地位至关重要.木质素不仅能增强细胞的机械支持力,保护细胞免受病原菌的侵害,还可作为橡胶的增强材料,改善天然橡胶的力学性能.我们以杜仲幼嫩叶为材料,提取总RNA,采用RT-PCR技术分离得到498bp片段,核苷酸序列与GenBank中苹果属肉桂醇脱氢酶(CAD)基因序列有64.1﹪的同源性,与桉树mRNACAD有63.9﹪的同源性.所克隆的cDNA编码165个氨基酸残基,氨基酸序列与苹果属CAD相应片段有68.5﹪的同源性,与桉树mRNACAD相应片段有66.1﹪的同源性,推测克隆的核苷酸片段为杜仲CAD的基因片段.
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