拟南芥鼠李糖合成酶基因RHM1的初步研究

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L-鼠李糖是植物细胞壁果胶多聚糖的重要组成成分之一,也存在于不同的次生代谢产物中,包括花色素苷、类黄酮和三萜。在模式植物拟南芥中,由鼠李糖合成酶(rhamnose synthase,RHM)催化底物UDP-a-D-葡萄糖生成UDP-L-鼠李糖。拟南芥RHM酶蛋白家族包含RHM1,RHM2和RHM3三个成员。本文主要对拟南芥中RHM1基因启动子中的相关调控元件进行定位,并通过构建RNAi突变体,过表达突变体对RHM1基因的进行了比较系统的研究。主要结果如下: 1)通过GUS组织化学染色与RT-PCR分析,结果表明,该基因除了在成熟的种子的没有表达外,在其余各个组织部位均高度表达,包括花、花絮、叶、茎、种荚和叶柄。 2)通过比较缺失启动子与全长启动子转基因幼苗的GUS染色情况发现在启动子的-752bp~-308bp区域可能存在与根表达相关的元件,在-308bp~-140bp区域可能存在与子叶表达相关的元件。 3)GUS定性和定量实验以及RT-PCR结果表明,RHM1基因的表达受葡萄糖和伤害诱导,并且推测参与葡萄糖调控途径的顺式作用元件位于基因上游启动子区-931bp~-752bp区域,伤害应答元件位于-752 bp~-308bp区域。 4)RHM1 RNAi 突变体、过表达突变体中在表型、抵御菌体侵染等方面与野生型无区别。
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