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刀豆蛋白A(concanavalinA，ConA)诱发小鼠急性肝损伤模型是近年来新发展起来的主要由T淋巴细胞和巨噬细胞等介导的免疫性肝损害模型，很好地模拟了人类病毒性肝炎、自身免疫性肝病等疾病。
枯否细胞(Kupffercell，KC)是唯一定植于肝内的单核-巨噬系统细胞，参与各种肝损伤的病理生理过程。
褪黑素(melatonin，MT)具有抗炎、免疫调节和自由基清除作用，在多种肝损伤模型及炎症免疫性疾病模型中均被证实具有减轻炎症及免疫性损伤的作用。
目的：
本实验通过小鼠体内枯否细胞消耗前后刀豆蛋白A诱导急性肝损伤结果的差异性比较，探讨验证枯否细胞在刀豆蛋白A诱导的急性免疫性肝损伤中的作用。
本实验还设计通过提前给予褪黑素干预治疗，并分离提取枯否细胞进行计数及功能鉴定，探讨褪黑素在这一型免疫性肝损伤中的干预效果和可能机制。
方法：
ICR小鼠，体重20±3g，64只，平均分为两批分别进行大体病理、血清学检测及离体枯否细胞功能试验。每批又再分以下4组建模：
1．正常对照组：无菌生理盐水0.3mL，尾静脉注射。
2.ConA模型组：根据ConA20mg/kg体重计算出所需ConA的用量，生理盐水稀释为0.3mL，尾静脉注射。
3．GdCl3预处理ConA组（GdCl3为枯否细胞消耗剂）：尾静脉注射0.5％GdCl3溶液（按10mg/kg体重计），48h后再尾静脉注射ConA20mg/kg0.3mL。
4．褪黑素预处理ConA组：腹腔预注射褪黑素（按1.0mg/kg体重计），30min后尾静脉注射ConA20mg/kg0.3mL。
大体实验对比ConA模型组，正常对照组，GdCl3预处理组，褪黑素(MT)干预组的血清转氨酶(ALT、AST)、组织病理切片HE染色、血清TNF-α水平。
枯否细胞体外实验分离提取以上4组枯否细胞比较他们在枯否细胞总数、分泌细胞因子TNF-α等方面功能活性的差异。
结果：
ConA模型组与正常对照组比较，在血清丙氨酸转氨酶(alanineaminotransferase，ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartateaminotransferase，AST)、血清肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactoralfa，TNF-α)水平、组织学损伤、枯否细胞总数、枯否细胞分泌功能方面有显著增高，差异均具统计学意义(p＜0.05)。
GdCl3预处理组、褪黑素预处理组分别与ConA模型组比较，以上各项均显著下降，具有统计学意义，具体如下：
血清丙氨酸转氨酶水平均下降：ALT:GdCl3预处理组vsConA模型组p＜0.01，褪黑素干预组vsConA模型组p＜0.05;AST：GdCl3与褪黑素两组vsConA模型组p均＜0.01；
血清TNF-α水平明显下降：GdCl3预处理组vsConA模型组p＜0.01，褪黑素预处理组vsConA模型组p＜0.05;
病理切片HE染成显示组织学损伤减轻；
枯否细胞分离所得总数两组均明显减少(p＜0.01)；
枯否细胞分离后单独培养24h后分泌损伤性细胞因子TNF-α的功能均显著降低(p＜0.01)。
结论：
1．经GdCl3预处理消耗枯否细胞后的小鼠在ConA的诱导下不能成功的诱导出的之前的急性免疫型肝损伤模型，这表明主要由淋巴细胞介导的，ConA诱发的急性免疫型肝损伤过程中，枯否细胞亦参与并发挥了不可或缺的作用。
2．褪黑素预处理组与ConA模型组的比较，表明褪黑素预处理后能通过减少肝脏枯否细胞数量，降低枯否细胞活性（本实验主要通过KCs分泌损伤性细胞因子TNF-α的功能反映），明显减轻肝损伤程度。