烟叶醇化是卷烟工业生产中的一个重要环节。在整个烟叶醇化过程中，烟叶表面存在着大量微生物，其作用贯穿烟叶醇化的始终，对改善烟叶品质起着重要作用。本文以烤烟品种K326为材料，应用免培养的手段对未醇化及醇化的烟叶表面微生物多样性进行分析，并将分析结果筛选定位出一株优势菌种--短小芽孢杆菌Van35，探讨短小芽孢杆菌对烟叶醇化和品质的影响。　　 主要研究结果如下：　　 （1）未醇化及醇化烟叶表面微生物16SrRNA序列限制性片段长度多态性（RestrictionFragmentLengthPolymorphism，RFLP）和操作分类单元（OUT）分析结果表明，未醇化烟叶样品共有50个OTUs，醇化烟叶样品共有42个OTUs。在未醇化的烟叶样品中，50个OTUs分属于细菌分属3大类群，分别是Proteobaeteria（63.66％），Firmicutes（35％），HighG+Cgram-positivebacteria（1.34％）。在醇化烟叶样品中，42个OTUs分属于细菌分类的3大类群，分别是：Proteobacteria（53.33％），Firmicutes（45.33％），HighG+Cgram-positivebacteria（1.34％）。醇化烟叶和未醇化烟叶中都发现的细菌有27种，其中12种细菌属于gamma-proteobacteria，大部分属于Bacillus和Pseudomonas两个属。另外，有23种细菌仅存在于未醇化的烟叶中，其中16种属于gamma-proteobacteria，19％的克隆属于Enterobacter属。有15种细菌仅出现在醇化烟叶中，其中7种属于gamma-proteobacteria，22.58％的克隆属于Bacillus属。　　 （2）在醇化烟叶和未醇化烟叶细菌的多样性研究中发现，Bacillus属在醇化前后都存在并且占很大比例，其中短小芽孢杆菌（Bacilluspumilus）是优势菌种。于是我们将从醇化烟叶表面分离筛选得到的短小芽孢杆菌Van35制成菌剂，并喷施于烟叶，在45℃，60％湿度下发酵21d后烟丝中总糖、还原糖和钾含量升高，纤维素、蛋白质、总氮和烟碱含量均有所下降，烟叶的糖氮比、糖碱比和氮碱比均有提高，化学成分比例更加协调。评吸结果表明，利用短小芽孢杆菌Van35处理后的烟叶样品，具有明显提调烟香、细腻醇和烟气、降低刺激性、掩盖杂气和改善卷烟吸味的效果。　　 本论文的创新性：　　 （1）采用免培养的方法对烤烟品种在醇化前和醇化后的细菌多样性进行比较和分析，并分别进行系统发育分析。　　 （2）从烟叶表面分离出短小芽孢杆菌Van35，报道了采用短小芽孢杆菌Van35处理烟叶能改善烟叶品质。