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作为烟气中的有害成分，多环芳烃越来越多的受到流行病学和吸烟与健康关系研究的关注。生物标志物法可以人体尿液中的多环芳烃羟基代谢物来评估人体所处吸烟环境中多环芳烃的暴露状态。因此，建立准确分析人体尿液中多环芳烃羟基代谢物的方法具有重要意义。本论文以此为目标，建立了三种方法，并对衍生化手段进行了初步的探索，具体内容如下：
一、考察了固相萃取柱、色谱柱和质谱条件对分析结果的影响，建立了测定尿液中11种多环芳烃生物标志物的固相萃取一液相色谱串联质谱方法(LC-MS/MS)。以1．羟基芘一d9（1-OHPyr-d9）、3一羟基菲一d9（3-OHPhe-d9）和1一羟基萘一d8（1-OHNap-d8）为内标，通过β-葡糖苷酸／芳基硫酸酯酶酶解、BondElutC18小柱固相萃取、AgilentZORBAXEclipsePAH色谱柱分离和多反应监测模式(MRM)质谱检测了尿液中多环芳烃的羟基代谢物(OHPAHs)。结果表明，OHPAHs的定量限为6～130pg/mL，r为0.9991～1.0000，加标回收率为72.5％-124.5％，日内精密度为1.5％-7.4％，日间精密度为2.9％～12.0％。该方法适用于尿液中多环芳烃生物标志物的分析。
二、考察了搅拌吸附萃取棒萃取时间和样品pH值对搅拌吸附萃取效果的影响，建立了搅拌吸附萃取—液相色谱串联质谱对人体尿液中11种多环芳烃生物标志物检测的方法。结果证明，该方法的日内精密度为3.1％～9.3％，日间精密度为3.3％～11.3％，回收率为7l.g％_126.7％。该方法大大节省了分析工作者的时间和精力，提高了样品处理通量，也减少了有机试剂耗费，对于实现绿色化学有重要意义。
三、比较了BondElutC18固相萃取柱和SupeIMIPTMSPE-PAHs分子印迹柱对人体尿液中多种多环芳烃生物标志物的萃取净化效果，建立了分子印迹一液相色谱串联质谱检测人体尿液中多环芳烃生物标志物的方法；对7名吸烟者与5名非吸烟者尿液中多环芳烃的生物标志物含量进行了检测分析。结果表明，SupeIMIPTMSPE-PAHs分子印迹柱的应用不仅降低了尿样的基质效应，而且显著提高了目标物的检测灵敏度，其检测限降低至1-5pg/mL。该方法的日内精密度为1.4％～9.3％，日间精密度为5.2％-19.7％，回收率为72.0％-129.1％。通过对吸烟者与非吸烟者尿样的分析，发现1．羟基萘、2一羟基萘和3一羟基芴与人体烟气的暴露量有明显相关，其在吸烟者尿样中的浓度高于非吸烟者数倍至数十倍。该方法灵敏度高，分析时间短，适于对样品的高通量处理。
四、采用1,2-=甲基咪唑-4-磺酰氯为衍生化试剂，对人体尿液中多环芳烃生物标志物检测进行了分析探索。结果表明，衍生化之后，除羟基苯并芘外，其余各化合物的同分异构体衍生物达不到色谱分离；1-OHPyr衍生化产物响应提高了10倍,3-OHBaP衍生化产物检测限降低至18.5pg/mL，衍生化产物在24h内比较稳定，适于分析；但是方法的重复性较差，步骤也较繁琐，因此还有待于进一步研究。