双微体和染色体的原子力显微镜研究

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目的:双微体(double minute chromosomes,DMs)是细胞中成对、无着丝粒、无端粒的、可自主复制的额外染色体成分,是基因扩增的主要表现形式,经常出现在肿瘤细胞及耐药细胞中,可使肿瘤细胞获得生存优势或产生耐药性。原子力显微镜(atomic force microscopy,AFM)是纳米科学的有力研究工具,并逐渐在生物学领域发挥着越来越重要的作用。它不仅有超高的原子级别的分辨率,而且对样品制备的要求条件极大的放宽,甚至还能做三维立体的数据测量。本实验应用原子力显微镜观察双微体中心的纤维组织的超微结构形式,以研究双微体是否具有和染色体骨架类似的结构。   方法:将本实验室制备的含双微体数目较多且十分稳定的UACC-1598单克隆细胞亚系用于制作细胞中期核型标本,经过碱液和胰酶的处理后,应用AFM扫描标本并逐步放大,直到可以用AFM扫描到清楚的超微结构图像并做相应的数据测量。然后将未经任何处理的标本分别与碱液和胰酶的处理过的标本进行对比。   结果:双微体与染色体有着相似的超微结构,即双微体与染色体中的纤维结构基本结构单位是直径为10 nm左右的纤维;碱液和胰酶处理后双微体与染色体超微结构变化相似。   结论:双微体与染色体有着十分相似的超微结构,由直径10 nm的纤维组成,提示二者具有相同的组成。
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