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围绝经期的来临是女性衰老的最早表现。被西医广泛应用于缓解围绝经期症状的激素替代疗法(Estrogen Replacement Therapy,ERT)虽然有一定疗效,但其安全性一直备受争议。传统中药方剂左归饮不仅具有确切的补益肾阴的功效,还能有效改善围绝经期症状,疗效优于单纯雌激素治疗,且副作用较小。目前左归饮在围绝经期综合征治疗中的应用日渐广泛,但其作用机制还不十分清楚,这限制了其推广以及疗效的进一步提高。据此,本研究采用分子生物学、生物化学及形态学等检测方法,从卵巢雌激素生成相关基因表达、细胞凋亡途径及微循环功能相关调节因子三方面入手,探索了左归饮对围绝经期卵巢功能的影响及作用机制,旨在为其临床应用提供有益的理论依据。
实验结果显示:(1)左归饮可通过促进围绝经期大鼠卵巢雌二醇的生成,改善围绝经期症状。其作用机制与上调卵巢雌激素生成经典途径FSHR→CYP19及卵巢局部ERα→LRH-1→CYP19途径相关基因的表达有关。(2)卵巢局部Bcl-2表达减弱,Bax、Fas及Caspase-3表达的增强,可能是引起围绝经期大鼠卵巢细胞凋亡增多,卵泡闭锁加剧,卵巢功能衰退的重要原因。左归饮可通过升高衰老卵巢Bcl-2表达,降低Bax、Fas、Caspase-3表达,抑制围绝经期大鼠卵巢细胞凋亡过程,改善卵巢功能。(3)卵巢血管新生相关因子VEGF、SPARC表达的异常改变,卵巢局部eNOS、iNOS、nNOS表达的下调,导致的NOS活性降低、NO生成减少,可能均与围绝经期大鼠卵巢微循环血管功能受损密切相关。左归饮可通过调节VEGF、SPARC基因表达的异常,上调eNOS、iNOS、nNOS表达,增加围绝经期大鼠卵巢NOS活性、NO生成,对衰老卵巢微循环发挥保护作用。
本结果表明,雌激素生成相关基因表达下调、细胞凋亡增多、微循环功能不良可能是导致围绝经期卵巢功能衰退的重要机制。左归饮能通过上调围绝经期卵巢雌二醇生成相关基因的表达,增加围绝经期大鼠体内雌二醇含量,改善围绝经期症状;调控卵巢局部凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Fas、Caspase-3的表达,抑制围绝经期大鼠卵巢细胞的过度凋亡;调节维持卵巢微循环功能的相关因子VEGF、SPARC、NO的异常改变,缓解围绝经期大鼠卵巢局部微环境缺氧状态,改善卵巢功能。上述结果提示,复方中药左归饮可通过作用于卵巢上多个靶点,延缓卵巢衰老过程,改善围绝经期症状。