肿瘤癌基因EIF5A2的转录调控研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kevendong
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:真核细胞翻译起始因子5A2(eukaryotic translation initiation factor5A2,EIF5A2)基因是近年来新发现的一个癌基因,它定位于人类染色体3q26.2,该区域的扩增常见于多种恶性肿瘤中。本研究的目的在于分析人EIF5A2基因启动子区的结构及与其作用的反式作用因子,为进一步研究该基因的表达调控机制奠定基础。   方法:本研究首先选取该基因转录起始位点上游2000 bp基因组DNA序列作为研究对象,分别构建四种不同长度截短片段的重组质粒,利用pGL3报告基因系统分析各截短片段的活性,最终确定EIF5A2基因核心启动区。进一步应用定点突变、凝胶阻滞(EMSA)技术对核心启动区内的潜在的转录因子结合元件进行确认。此外,应用实时定量PCR方法对EIF5A2基因与目的转录因子在卵巢癌组织中的表达情况进行了检测,并对二者在卵巢癌中转录水平的相关性进行了分析。   结果:研究表明,EIF5A2基因启动子核心启动区位于-143bp~+13bp范围。该区域存在四个Sp1转录因子结合位点。在Spl过表达的情况下,EIF5A2基因启动子活性显著增强。在Sp1高表达卵巢癌细胞系UACC-1598中,使用Sp1转录因子结合位点特异的抑制剂可以使EIF5A2蛋白的表达水平下降,此过程呈现剂量依赖性。此外,在卵巢癌组织样本中,EIF5A2基因与Sp1基因在转录水平的表达呈现正相关(Pearson相关系数=0.49,P=3.6×10-4)。   结论:EIF5A2基因启动子核心区位于-143bp~+13bp范围。该区域包含的四个Sp1转录因子结合位点,对EIF5A2基因启动子活性均具有显著的正调节作用。同时,EIF5A2基因与Sp1基因在卵巢癌组织中的转录水平表达呈现显著正相关(P<0.01)。
其他文献
数字视频压缩技术使庞大的视频数据的存储和传输更为方便快捷。随着MPEG-2编码视频日益增多,对这些压缩视频的处理成为了研究的热点之一。计算机非线性编辑被广泛用于视频的后
变形链球菌,Streptococcus mutans(S.mutans),革兰氏阳性菌,是人类龋齿及牙周疾病的主要致病菌之一。2005年至今,本实验室开展并完成了变形链球菌结构基因组学研究,解析了多个蛋白
石油被誉为现代化工业发展的血液,近些年,随着我国经济的高速增长,石油在我国常规能源结构中所占的比重越来越大,中国石油需求的缺口也越来越大,石油已经威胁到了我国国家能源战略
近年来,功耗已经成为了系统芯片设计中的一项重要指标。由于工艺、温度以及电压(ProcessVoltage&Temperature variation,PVT)等偏差因素的影响,传统设计采用最坏情况验证法使得
本文通过对荣华二采区10
植物如何在生长与繁殖做出权衡、如何通过繁殖器官的形态变异提高自身种子产量是进化生物学的核心问题。在资源有限、竞争强烈的条件下,植物可以采取不同的生活史格局和繁殖策
本文通过对荣华二采区10
目的:研究塞来昔布(celecoxib)对丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)在原发性肝癌细胞系中复制的影响及其作用的分子机制。   方法:用含有HCV基因组cDNA全序列的质粒转染肝
翻译后修饰对蛋白质功能的发挥具有重要的调节作用。SUMO作为一种重要的类泛素化修饰蛋白,其空间结构和修饰过程与泛素非常类似,但却有着不同且更为多样化的生物学功能:如调节蛋
目的:双微体是基因扩增的主要载体和细胞遗传学标志,含有癌基因和耐药相关基因,因此它的存在与衰老、基因组不稳定、恶性肿瘤及细胞耐药密切相关。本课题以小鼠胚胎成纤维细胞系