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目的:探讨罗格列酮对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)血管紧张素Ⅱ1型受体(AT<,1>R)和血管紧张素Ⅱ2型受体(AT<,2>R)表达的影响,为过氧化酶增殖体活化受体γ(PPARγ)激动剂抗炎、抗动脉粥样硬化(AS)作用提供实验依据。
方法:取一月龄雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠的胸主动脉平滑肌细胞(SMCs),采用组织贴块法进行培养。选6~10代处于对数生长期的大鼠VSMCs进行后续实验。首先用终浓度为1μmol·1<-1>AngⅡ诱导2h后,然后随机分成A、B、c组,分别加入终浓度为20、30、50)50μmol·1<-1>罗格列酮培养12h;另外,取预先用终浓度为lμmol·1<-1>AngⅡ诱导6h的大鼠VSMCs,随机分为D、E、F组,加入终浓度为30μmol·1<-1>的罗格列酮分别再培养6h、12h、24 h。采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PeR)和免疫组织化学方法观察罗格列酮不同浓度及同一浓度不同的干预时间对大鼠VSMCs AT<,1>R和AT<,2>R mRNA及蛋白表达水平的影响。
结果:
1、基础状态下,体外培养的大鼠VSMCs AT-R和ATzR均有少量的表达。AngⅡ显著上调AT<,1>R mRNA和蛋白表达,下调AT<,2>R mRNA和蛋白表达。
2、罗格列酮干预后,A、B、C组ATIR mRNA和蛋白的表达均显著下降,C组下降最大,与干预前相比均有统计学差异。D、E、F组AngⅡ诱导的大鼠VSMCs AT<,1>R mRNA和蛋白的高表达均有不同程度的下调,F组的下调程度最明显。
3、罗格列酮明显上调AT<,2>R mRNA和蛋白的表达,在C组达到最大;D、E、F组则不同程度的上调Ang Ⅱ诱导的大鼠VSMCs AT<,2>R mRNA和蛋白的表达,与D、E组比较,F组的上调程度最明显。
结论:
1、基础状态下,体外培养的大鼠VSMCs内AT-R和AT<,2>R均有少量的表达。Ang Ⅱ显著上调AT<,1>RmRNA和蛋白表达,下调AT<,2>R mRNA和蛋白表达;
2、一定浓度范围内,罗格列酮可呈浓度依赖和时间依赖性地下调AngⅡ诱导的大鼠VSMCsAT<,1>R mRN和蛋白的表达:
3、一定浓度范围内,罗格列酮可呈浓度依赖和时间依赖性地上调AngⅡ诱导的人鼠VSMCsAT<,2>R mRNA和蛋白的表达,这可能是PPAR γ激动剂具有抗炎、抗AS作用的重要机制之一。