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杯珊瑚菌(Clavicorona pyxidata)是一种食用、药用真菌,属于非褶菌目、珊瑚菌科、杯珊瑚菌属。杯珊瑚菌子实体干粉通过乙醇热回流提取、有机溶剂萃取、硅胶GF254薄层层析、HPLC分离纯化手段,得到三种活性成分,一种为甾体皂苷E1H3,另外两种为小分子酚酸类物质E2H1和E3H3。经过高分辨有机质谱HR-ESI-MS及核磁共振氢谱1H-NMR进行结构鉴定后,确定两种酚酸类物质分别为对羟基苯甲酸和原儿茶酸。
E1H3为一种黄色油状物且具有一定的抗氧化活性,在高浓度500μg/ml时,小鼠脑脂质过氧化抑制率达63.1%,得率仅为0.02%0。E2H1和E3H3均具有显著的抗氧化活性。在250μg/ml时,E2H1的小鼠红细胞溶血抑制率为73.6%,E3H3在较低浓度62.5μg/ml时表现出极显著的活性,抑制率达94.9%,而在高浓度时表现为促氧化。在自由基清除方面,E3H3表现出了显著的DPPH自由基清除活性,EC50为6.0μg/ml,高于相同条件下的正对照Vc。E2H1则在超氧阴离子自由基的清除方面具有比E3H3高的活性,200μg/ml时清除率达17.6%。
通过测试模型菌株E.coli BL21-pPR,发现E3H3在0.5μg/ml时对HIV-1蛋白酶抑制率达到最大为20.3%,与正对照PepstatinA的作用(抑制率20.0%)相近。本研究还建立了双氧水诱导的小鼠脾细胞氧化损伤模型,证明E2H1和E3H3在设置的两个浓度(10μg/ml和40μg/ml)下对氧化损伤的小鼠脾细胞具有一定的保护作用。此外,E2H1具有较好的抑菌作用。
本研究得到了三种小分子活性成分,并研究了两种酚性成分的HIV-1蛋白酶抑制活性,细胞氧化损伤修复作用及抑菌活性。构效关系支持了邻位酚羟基及羧基的存在对抗HIV-1具有一定相关性。本课题一方面为开发利用食用、药用真菌提供理论指导,另一方面为开发具有生物活性的酚类衍生物奠定一定基础。