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目的:探讨慢性乙型肝炎患者Treg/Th17细胞失衡与肠源性内毒素血症的关系及机制。 资料与方法: 1.临床资料:80例慢性乙型肝炎患者,均于2014年12月至2015年10月期间在山西医科大学第一医院感染病科住院诊治(CHB组),诊断均符合新版《慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)》,所有入选的患者均未患有甲、丙、丁、戊型肝炎病毒感染及其他原因引起的急慢性肝功能异常,且均在6个月内未行抗HBV治疗或免疫调节治疗。20名健康体检者(HC组)。所有入选对象均经山西医科大学第一医院医学伦理委员会的批准,并签署书面的知情同意。 2.方法:全部研究对象留取空腹静脉血。采用显色基质鲎试验法测定血清内毒素(ET)水平,以健康体检者血清内毒素水平的95%可信区间的上限值为界限,大于等于此值的CHB患者为内毒素阳性组,小于此值的CHB患者为内毒素阴性组。采用Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞分析术测定PBMC中CD4+Foxp3+Treg及CD4+IL-17A+Th17细胞的计数,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定PBMC中Foxp3、RORγt mRNA的表达,结合患者谷丙转氨酶(ALT)、HBV-DNA水平,采用SPSS17.0软件进行统计分析。 结果: 1.内毒素阳性组与阴性组的界定:20例健康体检者内毒素水平95%可信区间的上限值是0.12 EU/ml。80例CHB患者中44例血清内毒素水平大于等于此值,将其分为内毒素(ET)阳性组,余36例为内毒素(ET)阴性组。 2. CHB组 Treg、Th17细胞百分比、Foxp3、RORγt相对表达量分别是(6.51?1.18)%、(4.99?1.07)%、(2.12?0.83)、(1.56?0.77),与HC组比较(5.91?1.29)%、(4.18?0.87)%、(1.60?0.70)、(1.09?0.59),均明显增高,P值均<0.05,差异有统计学意义。 3. ET阳性组Treg、Th17细胞百分比、Foxp3、RORγt相对表达量、Th17/Treg比率、RORγt/Foxp3比率、ALT分别是(6.75?1.17)%、(5.39?1.03)%、(2.29?0.90)、(1.84?0.76)、(0.82?0.19)、(0.95?0.38)、(220.16?115.82)(U/L),与ET阴性组比较,(6.21?1.14)%、(4.48?0.91)%、(1.91?0.70)、(1.23?0.64)、(0.74?0.16)、(0.74?0.54)、(170.86?99.69)(U/L),均明显增高,P值均<0.05,差异有统计学意义。 4. ET阳性组 HBV DNA平均水平(4.88?0.75) log10IU/ml与 ET阴性组(4.76?0.68)log10IU/ml比较增高,但无明显统计学差异,P值>0.05。 结论: 1. CHB患者体内存在Treg/Th17细胞失衡,其可能参与HBV感染的慢性化。 2. CHB患者体内Treg/Th17细胞失衡可能与肠源性内毒素血症有关,其机制可能是内毒素增加了Foxp3、RORγt mRNA的表达,从而导致Treg/Th17细胞比例失衡,进而引起HBV感染慢性化。