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牛皮消(Cynanchi Auriculati)系萝摹科鹅绒藤属(Auriculatum)植物,主要分布在我国江苏、山东、宁夏等地。近年来,有关牛皮消化学成分和药理活性方面的研究已有所报道,但关于牛皮消杀虫活性方面的研究尚未见报道。本论文从农药学和植物化学的角度系统研究了牛皮消的杀虫活性,通过化学成分分离和生物活性跟踪相结合的方法,筛选出了其中的活性成分,并对活性成分的结构进行了鉴定。主要结果如下:1.牛皮消不同溶剂和不同方法提取物杀虫活性比较
分别选用不同的溶剂(石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、丙酮、蒸馏水)和不同的方法(索氏提取、热回流、渗漉法、温浸、超声法、浸渍法)提取了牛皮消中的活性成分,测试不同溶剂和不同方法提取物对小菜蛾的活性,结果表明牛皮消乙醇超声提取物对小菜蛾的活性较好。2.牛皮消乙醇提取物对不同试虫的活性比较
测试了牛皮消乙醇提取物对不同试虫的活性,结果显示48h的活性为:枸杞蚜虫(97.70%)>桃树卷叶蛾(88.91%)>小菜蛾(83.33%)>菜青虫(30.00%)>小麦粘虫(0);72h活性为小菜蛾(89.79%)>菜青虫(43.33%)。3.牛皮消与商品农药对小菜蛾的活性比较
比较了相同浓度下,牛皮消乙醇提取物与儿种商品农药对小菜蛾的活性,结果显示几种农药对小菜蛾触杀活性由强到弱依次为(以LC50表示):牛皮消2.130mg/mL>辛硫磷3.930mg/mL>敌敌畏4.360mg/mL>高效氯氟氰菊酯4.510mg/mL。4.牛皮消对小菜蛾的活性作用方式研究
分别采用点滴法、载毒叶片法测试了牛皮消乙醇提取物对小菜蛾的触杀活性、拒食活性和生长发育抑制活性,结果显示72h触杀活性的致死中浓度LC50=2.130mg/mL,致死中量LD50=3.190mg/头;24h、48h的非选择性拒食中浓度(AFC50)分别为0.200mg/mL、1.100mg/mL;胃毒活性为38.46%;化蛹率和羽化率分别为53.84%、30.00%,对照组化蛹率和羽化率分别为93.33%、90.00%。5.牛皮消不同部位的活性比较
测试了牛皮消不同部位乙醇提取物对小菜蛾的活性,结果表明,在50.00mg/mL浓度下,不同部位对小菜蛾的触杀活性依次为:叶(90.00%)>根(83.33%)>茎(80.00%)=花(80.00%)。6.牛皮消挥发性成分的活性
采用室内熏蒸法测试了牛皮消挥发性成分对小菜蛾的活性,结果显示牛皮消地上部分挥发性成分在浓度97μg/mL时对小菜蛾无熏蒸活性,根挥发性成分在浓度178μg/mL时对小菜蛾的活性仅为6.67%。7.牛皮消杀虫活性成分的筛选
选用五种不同极性的溶剂依次萃取牛皮消中的活性成分,测试不同溶剂萃取物对小菜蛾的活性,结果表明牛皮消地上部分活性顺序为石油醚(97.95%)>氯仿(42.17%)>乙酸乙酯(28.57%)>水(18.37%)>正丁醇(11.53%);根中活性分布顺序为氯仿(92.76%)>石油醚(66.67%)>水相(42.33%)>乙酸乙酯(31.56%)>正丁醇(11.54%)。8.牛皮消杀虫活性成分的分离及结构鉴定
采用柱色谱分离及活性跟踪检测的方法逐步从牛皮消地上部分和牛皮消根中分离得到杀虫活性物质,通过GC/MS分析鉴定和NMR、IR图谱分析及元素分析推断,地上部分活性成分含量最高的是β-谷甾醇和麦角甾烷,牛皮消根中的活性成分为β-谷甾醇。