【摘 要】
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本文从中医经典古籍入手，对历代医书及当代医家有关肝癌的文献进行了整理研究，从病名沿革、病因病机等方面梳理其学术发展脉络，并重点阐述了柴胡注射液与肝癌治疗之间的关系，提出了柴胡注射液能抑制人肝癌细胞的增殖及促进其凋亡的观点。目的：本实验采用柴胡注射液作用于体外培养的人肝癌细胞株HepG2，抑制其增殖，诱导细胞凋亡，并从分子水平探讨其发生的可能机制。方法：1、柴胡注射液抑制人肝癌细胞株HepG2增殖的
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本文从中医经典古籍入手，对历代医书及当代医家有关肝癌的文献进行了整理研究，从病名沿革、病因病机等方面梳理其学术发展脉络，并重点阐述了柴胡注射液与肝癌治疗之间的关系，提出了柴胡注射液能抑制人肝癌细胞的增殖及促进其凋亡的观点。
目的：
本实验采用柴胡注射液作用于体外培养的人肝癌细胞株HepG2，抑制其增殖，诱导细胞凋亡，并从分子水平探讨其发生的可能机制。
方法：
1、柴胡注射液抑制人肝癌细胞株HepG2增殖的实验研究。
1.1空白对照组(含10％小牛血清的1640培养液)和氟尿嘧啶阳性对照组(血峰浓度10μg/L)，及柴胡注射液3mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、25mg/ml、50mg/ml不同浓度实验组。
1.2噻唑蓝比色法(MTT)检验人肝癌细胞株HepG2对柴胡注射液的药物及对氟尿嘧啶注射液敏感性。
1.3应用流式细胞术(FCM)检测人肝癌细胞株HepG2周期的改变。
2、柴胡注射液诱导HepG2细胞凋亡研究。
2.1应用倒置显微镜、荧光显微镜观察细胞凋亡形态的改变。
2.2应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。
2.3一步法TUNEL检测细胞凋亡率。
结果：
1、柴胡注射液对HepG2的生长有明显的抑制作用，并诱导细胞发生凋亡，MTT检测表明柴胡注射液对人肝癌细胞的增殖有剂量——效应关系，随浓度的升高，抑制率增高，其半数抑制浓度为(IC50)约为50mg/ml。
柴胡注射液微剂量(3mg/ml)与空白对照组之间无显著性差异，柴胡注射液25mg/ml组与阳性对照组氟尿嘧啶组之间无显著性差异，其他各组之间进行两两比较，均有显著性差异。
根据流式细胞仪检测结果提示，当浓度为5mg/ml、10mg/ml、25mg/ml柴胡注射液作用人肝癌细胞株HepG2 12小时后，G1期的细胞的百分比不断减少，柴胡注射液为5mg/ml、10mg/ml、25mg/ml时，G1％分别为66.30％，57.27％，49.23％。可见柴胡注射液对人肝癌细胞株HepG2的阻滞主要在G1期。
2、柴胡注射液对体外肝癌细胞株HepG2凋亡的影响
2.1加入柴胡注射液12h后，与空白对照组相比，HepG2细胞形态发生显著变化，倒置显微镜下观察发现细胞体积缩小，变圆，胞浆量减少，并随着药物浓度增加，贴壁细胞逐渐减少，悬浮细胞增多；而当柴胡注射液实验组浓度达到25mg/ml时，其作用效果与氟尿嘧啶阳性对照组几乎相同。
2.2经柴胡注射液作用后的HepG2细胞，流式细胞直方图上均可见亚二倍体峰，且凋亡率随用药浓度的增大而增大，呈剂量依赖性。
2.3一步法TUNEL检测时，柴胡注射液作用12h后，细胞凋亡率均明显高于空白对照组。
结论：
1、柴胡注射液可抑制HepG2细胞的增殖，使细胞阻滞在G1期。
2、柴胡注射液可诱导HepG2细胞凋亡，并出现凋亡所特有的形态学及生化改变。
3、柴胡注射液中的有效成分可能是治疗肝癌潜在的药物。
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