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目的:研究六味地黄汤超微和传统饮片对胎鼠脑发育不全的干预作用,并从增殖与凋亡角度探讨其机理。
方法:采用孕鼠被动吸烟造成胎鼠脑发育不全,分别给予六味地黄汤超微和传统饮片进行治疗。采用病理形态学检测神经元尼氏体;原位杂交法检测BDNFmRNA 和TRK-BmRNA;免疫组织化学法检测BAX 、BCL-2、和Caspase-3;分光光度比色法测定SOD 和MDA。检测学习记忆和神经反射能力。
结果:
①尼氏染色阳性细胞数比较:模型组1 胎鼠脑组织中数量比正常组明显减少,差异有统计学意义(p<0.01);各治疗组细胞数均较模型组多,差异有统计学意义(p<0.01);
②BDNFmRNA 和TRK-BmRNA 的比较:模型组1 阳性细胞数均较正常组低,差异有统计学意义(P<0.01);经治疗后,超微组1 和超微1/3 组1BDNFmRNA 和TRK-BmRNA 与模型组1 相比均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);传统组1 和模型组1 相比,BDNFmRNA 和TRK-BmRNA 亦有显著改变,差异有统计学意义(分别为P<0.05, P<0.01)。
③BAX 和BCL-2 的比较:模型组1 二者均明显高于正常组,差异有统计学意义(p<0.01);治疗组1 与模型组1 相比BAX 明显减少,差异有统计学意义(p<0.01);但仍高于正常组1,差异有统计学意义(p<0.01);治疗组1 与模型组1 相比BCL-2变化不大,差异无统计学意义(p>0.05)。
④Caspase-3 的比较:与正常组1相比,其余各组Caspase-3 均明显升高,差异有统计学意义(p<0.01);各治疗组与模型组1 相比Caspase-3 明显减少,差异有统计学意义(p<0.01);但仍高于正常组,差异有统计学意义(p<0.01);超微全量组1和1/3量组1 的疗效优于传统组,差异有统计学意义(分别为p<0.05 和p<0.01);超微全量组1 的疗效优于超微1/3 量组1,差异有统计学意义(p<0.01)
⑤SOD 和MDA 的比较:与正常组相比,模型组1 胎鼠脑SOD 有所下降,但差异无统计学意义(p>0.05);治疗后各组SOD 均有所上升,但只有超微全量组1和模型组1相比差异有统计学意义(p<0.05)。与正常组1相比,模型组1胎鼠脑MDA 明显升高,差异有统计学意义(p<0.05);治疗后各组MDA 均有所下降,但只有超微全量组1 和模型组1 相比差异有统计学意义(p<0.05)。
⑥神经反射:悬崖躲避反射与正常组2相比,模型组2、超微组2和超微1/3 组2 所用时间明显延长,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组2 相比,传统组2 和超微组2 所用时间明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。负趋地性反射与正常组2相比,模型组2所用时间明显延长,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组2相比,三个治疗组所用时间明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。
⑦学习记忆:训练成绩与正常组2相比,模型组2 错误次数和游泳时间明显增加, 差异有统计学意义(p<0.01)。与模型组2 相比,超微组2 和超微1/3 组2 错误次数和游泳时间明显缩短, 差异有统计学意义(p<0.01);传统组2错误次数和游泳时间缩短,差异有统计学意义(分别为p<0.05,p<0.01)。记忆成绩与正常组2 相比,模型组2 错误次数和游泳时间明显增加, 差异有统计学意义(p<0.01)。与模型组2 相比,超微组2 错误次数减少,游泳时间明显缩短,差异有统计学意义(分别为p<0.05,p<0.01);超微1/3 组2错误次数减少,游泳时间明显缩短,差异有统计学意义(分别为p<0.05,p<0.01); 传统组2的游泳时间明显减少,差异有统计学意义(p<0.01)。传统组2 的游泳时间比超微1/3 组2 明显减少,(p<0.01)。
结论:孕期被动吸烟可以导致胎鼠脑发育不全,表现为脑组织中尼氏染色阳性神经元数量减少;MDA、Caspase-3、BAX 和BCL-2 表达水平升高;SOD、BDNFmRNA 和TRK-BRNAmRNA 表达水平降低;学习记忆和早期神经反射减弱。六味地黄汤能抑制尼氏染色阳性细胞数量的下降;降低神经元Caspase-3和BAX 的表达水平;提高BDNFmRNA 和TRK-BmRNA表达水平;提高胎鼠脑SOD 活性,降低MDA 活性;改善学习记忆和早期神经反射功能,从而起到抵抗烟雾毒害和改善胎鼠大脑发育不全的效应。