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目的 将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein，EGFP)基因转染至由兔骨髓基质细胞(marrow stromal cells，MSCs)诱导的成骨样细胞中，探讨EGFP作为移植细胞示踪剂的可行性。 方法 抽取兔股骨骨髓后直接接种在含有L-DMEM完全培养基的培养瓶中，24小时后首次换液，体外培养扩增。将传至第4代的细胞用成骨诱导液向成骨细胞诱导，10天后检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)的活性和Ⅰ型胶原蛋白的表达。 用脂质体转染试剂将质粒pEGFP-C1转染至诱导的成骨样细胞中，观察其瞬时转染效果；转染72小时后，用含G418的成骨培养液进行筛选，继续培养25天，观察稳定转染情况。 结果 原代培养接种24小时即可见细胞贴壁生长，呈梭型、多角型的成纤维细胞样，增殖迅速，传代后生长情况良好。MSCs经成骨培养液诱导后，形态未发生显著改变；但是，具有ALP的活性，并可以表达Ⅰ型胶原蛋白。经转染EGFP基因后25天可稳定表达绿色荧光蛋白。 结论 EGFP能转染到由MSCs诱导的成骨样细胞中稳定表达，因此可以作为骨组织工程种子细胞的示踪剂。