S-腺苷蛋氨酸对LX-2肝星状细胞增殖的影响及机制研究

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目的:观察S-腺苷蛋氨酸(SAMe)对LX-2肝星状细胞株(HSC)增殖的影响,探讨S-腺苷蛋氨酸对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的肝星状细胞TGF-β1-Smad信号传导通路的影响。  方法:体外培养人源LX-2-HSC,CCK-8实验检测SAMe对其增殖的影响,并选择其中3种有效浓度用于观察S-腺苷蛋氨酸对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的肝星状细胞TGF-β1-Smad信号传导通路的影响。实验共分5组,A组:空白组,B组:TGF-β1组(浓度为10ng/ml),C组:SAMe(2mmol/L)+TGF-β1组(浓度为10ng/ml),D组:SAMe(4mmol/L)+TGF-β1组(浓度为10ng/ml),E组:SAMe(8mmol/L)+TGF-β1组(浓度为10ng/ml)。采用western-blot方法检测SAMe对TGF-β1诱导的HSC表达Ⅰ型胶原蛋白(COL-1)及TGF-β1信号传导相关分子Smad3、Smad4的影响。  结果:(1)CCK-8实验表明lmM SAMe组同对照组之间比较,LX-2肝星状细胞增殖差异无统计学意义(P=0.145);其余各浓度组同对照组间的差异均存在统计学意义(P<0.05),且不同浓度组之间的差异均有或近似有统计学意义。(2)Western-blot检测Ⅰ型胶原蛋白结果表明,TGF-β1组显著增加了Ⅰ型胶原蛋白的表达(P<0.05),加入SAMe组显著抑制了TGF-β1诱导的HSCⅠ型胶原蛋白表达(P>0.05),且SAMe浓度越大抑制作用越明显。(3)Western-blot检测Smad3结果表明,TGF-β1组有增加HSC内Smad3的趋势(P=0.8064),加入SAMe组显著抑制了HSC细胞内Smad3的产生,且浓度越大抑制越明显。(4)Western-blot检测Smad4结果表明TGF-β1组显著增加了Smad4的表达(P<0.05),加入SAMe组显著抑制了HSC细胞内Smad4的产生(除C组外,其余P<0.05)且浓度越大抑制越明显  结论:(1)SAMe能够抑制体外培养的HSC的增殖(2)SAMe能够抑制HSC产生Ⅰ型胶原蛋白的能力(3)SAMe对HSC增殖的抑制作用可能是通过对TGF-β1信号通路相关分子Smads起作用的。
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