华支睾吸虫病是一种重要的人兽共患寄生虫病。据估计，全球约有3500万人感染华支睾吸虫，其中我国大约有1500万人感染。本病可使肝脏肿大，并导致肝脏病变，病情多呈慢性经过。该病分布于我国多个省、市、自治区，其中以广东省人群感染率最高。目前，湖南省华支睾吸虫的感染情况还不清楚；另外，国内外华支睾吸虫线粒体基因组研究比较少。因此，本论文的研究目的为：一、华支睾吸虫特异PCR方法的应用；二、我国不同地区华支睾吸虫线粒体基因多态性研究；第三、湖南省长沙市淡水鱼吸虫囊蚴感染情况调查和种类鉴定。 本研究第一部分是华支睾吸虫特异PCR方法的应用。应用华支睾吸虫特异引物CStjd1/CStjd2对采自广东省不同地区的犬、猫肝吸虫，进行特异PCR鉴定。结果发现：总共245份犬猫肝吸虫DNA样品均出现华支睾吸虫的特异性条带，片段大小约400bp，无非特异性条带出现，可判定所有肝吸虫样品均是华支睾吸虫。特异PCR检测方法具有高效、快速、特异性强和敏感性高等特点，有助于华支睾吸虫病作出准确的判断，为进一步治疗和预防提供诊断依据。 本研究第二部分是我国不同地区华支睾吸虫线粒体基因多态性研究。对华支睾吸虫的cox1，cox2，nad1和nad2基因部分序列进行分析研究，从线粒体基因的角度，开展线粒体遗传变异和DNA多态性研究。通过测序分析发现，不同地区华支睾吸虫线粒体DNA的四个基因片段种内无长度差异性，pcox1，pcox2，pnad1和pnad2分别扩增出长度为381 bp、420 bp、432 bp和513 bp的基因片段。pcox1序列差异在0.0～1.3％之间；pcox2序列差异在0.0～1.4％之间pnad1序列差异在0.0～0.9％之间；pnad2序列差异在0.0～1.0％之间。线粒体pcox1，pcox2，pnad1和pnad2基因片段分别有10、10、8和12个变异位点，其中主要为转换突变，且变异位点多在第三密码子，因此多为无义突变。将四段线粒体基因序列片段连接起来，以三种构树方法进行系统发育重建显示：来自广东省不同地区华支睾吸虫种内差异极小，没有明显的地区或寄生宿主分化。 本研究第三部分是对湖南省长沙市售淡水鱼吸虫囊蚴感染情况进行调查和种类鉴定总共采集了淡水鱼25种，274尾，171尾有吸虫囊蚴感染，感染率为62.41％。其中采自湘江和浏阳河的野生鱼尾数为203，阳性鱼尾数为141，感染率为69.45％；市场采集鱼尾数为71，阳性鱼尾数为30，感染率为42.25％；野生鱼感染率和感染强度都明显高于饲养鱼。应用华支睾吸虫特异PCR引物扩增淡水鱼阳性样品DNA，所有样品均无华支睾吸虫特异性条带；应用保守引物(BD1/BD2)对淡水鱼阳性样品进行PCR扩增，所得核糖体ITS序列与基因库序列比对后发现：在长沙市淡水鱼感染的全部吸虫囊蚴中未发现华支睾吸虫囊蚴，而是分属于四个不同种的吸虫囊蚴。鲤鱼、鲫鱼等感染的吸虫囊蚴ITS1和ITS2与全冠吸虫属的Holostephanus dubinini ITS1和ITS2序列差异性分别为7.7～8.1％和9.5％，可推断鲫鱼、鲤鱼感染的吸虫囊蚴是全冠吸虫属的一个成员；银飘鱼、鳙鱼和餐条感染的吸虫囊蚴ITS1和ITS2与库伦属的Dexiogonimus ciureanus的ITS1和ITS2序列差异性分别为9.2～9.6％和5.1％，可推断此种吸虫囊蚴是库伦属的一个成员；西湖颌须鮈、银鲴鱼和洞庭棒花鱼感染的吸虫囊蚴ITS1与牛首科牛首属的多形牛首吸虫ITS1序列差异性为23.5～24.0％，ITS2序列差异性为41.8～44.7％，可推断它们感染的吸虫囊蚴可能为牛首科的一个成员；黄颡鱼、中华鰟鮍、鳜鱼、塘鳢等感染的吸虫囊蚴ITS1与棘带属的未定种棘带吸虫ITS1序列差异性为44.1～45.2％，ITS2序列差异性为29.0～30.8％，可推断它们感染的吸虫囊蚴可能为异形科的一个成员。