流感是由流感病毒引起的人畜共患呼吸道传染性疾病，其发病率和死亡率高。2003年开始爆发的高致病性H5N1亚型禽流感不仅导致禽鸟大量死亡，给养禽业造成巨大损失，而且先后导致250余人相继感染死亡；2009年3月以来，源于墨西哥、美国的甲型H1N1型流感，迅速传播到全球42个国家和地区，已有上万人感染、85死亡。尽管人类对流感的认识已有近百年的历史，但对流感特别是高致病性流感防治的医药技术还十分薄弱。疫苗接种可有效预防流感爆发，但流感病毒亚型多，各亚型抗原易变异，单纯依靠疫苗很难完全防治疫情；目前用于治疗高致病性流感的药物很少，对普通流感有较好疗效的药物“达菲”对高致病性流感效果也不理想。因此寻找新型高效抗流感病毒药物，对流感的防治有十分重要的意义。 本论文通过抗流感病毒药物的筛选试验发现，蟾酥氯仿提取物对感染H9N2 AIV小鼠有显著的保护作用。因此，本文运用H9N2 AIV小鼠感染模型、MDCK细胞感染模型和角叉菜性“关节炎”模型，研究蟾酥氯仿提取物对流感病毒的抑制作用和抗炎药理活性，并初步探讨其作用机制。此外，本论文利用液相色谱—质谱连用仪，对蟾酥氯仿提取物中主要化学组成进行了初步分析。 小鼠感染试验：利用H9N2 AIV小鼠感染模型，分别进行肺炎保护率试验和死亡保护试验评价蟾酥氯仿提取物的抗流感病毒活性。小鼠肺炎保护试验结果表明，蟾酥氯仿提取物对H9N2 AIV致小鼠病毒性肺炎有明显的抑制作用。与病毒对照组相比，20mg/kg蟾酥氯仿提取物组的肺指数显著减小(P<0.05)，肺指数抑制率为20.3％。小鼠死亡保护试验结果表明，在预防给药方式下，20mg/kg蟾酥氯仿提取物对感染病毒的小鼠表现出极显著的保护作用(P<0.01)，存活率和生命延长率分别为50.0％和78.3％。 细胞感染试验：利用H9N2 AIV细胞感染模型，通过先加药后接种病毒、先感染病毒后加药、感染病毒同时加药等对MDCK细胞的三种处理方式，研究蟾酥氯仿提取物对H9N2 AIV的抑制作用，并据此推测其抗病毒作用环节。蟾酥氯仿提取物在同时作用方式中对感染H9N2 AIV MDCK细胞的保护作用最好，0.94×10-3mg/mL蟾酥氯仿提取物的保护率高达66.6％，优于阳性对照药物利巴韦林(0.13mg/mL)。推测蟾酥氯仿提取物对流感病毒有直接抑制作用。 对角叉菜胶性“关节炎”的抗炎试验结果表明，20mg/kg蟾酥氯仿提取物组和13mg/kg地塞米松组大鼠足跖肿胀程度显著低于阳性对照组(P<0.01)，蟾酥氯仿提取物对大鼠角叉菜胶性“关节炎”有明显的抑制作用，其足跖肿胀抑制率为50.9％。 本文还利用液相色谱—质谱连用仪，参考相关的研究文献，对蟾酥氯仿提取物所含化学成分进行分析，初步鉴定该提取物含有11β—羟基—蟾蜍灵、远华蟾蜍精、去乙酰华蟾蜍精、沙蟾蜍精或嚏根草苷元、华蟾蜍它灵、蟾蜍它灵、蟾酥灵和华蟾素精等8个蟾酥内酯类化合物及胆甾烯醇等共9个化合物。 综合各试验结果表明：蟾酥氯仿提取物对感染H9N2 AIV小鼠有显著的保护作用，其作用机制可能主要通过两种途径：首先在病毒感染复制过程中直接抑制病毒，而后抑制流感病毒导致的小鼠肺部炎症。其药效成分为蟾酥内酯类化合物。